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如何提高CIK细胞中CD3+CD56+的量?     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-9-24 09:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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最近在做CIK细胞培养方面的实验,按照最基本的培养体系——无血清培养基+CD3单抗+细胞因子(IFN,IL-2,IL-1),培养16天左右,CD3+CD56+细胞含量只有12%左右,低于文献报道,请问如何提高该细胞的含量,需要添加其他细胞因子吗,若要添加,浓度应控制在什么范围内?
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金话筒 帅哥研究员 小小研究员 优秀会员

沙发
发表于 2013-9-24 11:11 |只看该作者
你可以 尝试用 含有胎牛血清的培养基培养~  CD3激发型单抗能够模拟抗原与TCR/CD3复合物的识别和激活过程,从而引起T细胞的增殖与活化,因此是CIK细胞培养中不可或缺的刺激因素;IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2,以促进T细胞的增殖与活化;在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- g ,可降低IL-2的用量。研究发现,IFN-g加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- g,培养24后再加入IL-2,可明显提高CIK的细胞毒活性。
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藤椅
发表于 2013-9-25 09:48 |只看该作者
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0 S! y1 m5 X- K$ o7 K2 A8 e' ?" [2 r( R& M
CD3激发型单抗?你用的是什么厂家的,型号能给一下吗?

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金话筒 帅哥研究员 小小研究员 优秀会员

板凳
发表于 2013-9-26 11:26 |只看该作者
OKT-3(CD3)肯定是 激发型单抗啊!!!
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报纸
发表于 2013-10-1 09:11 |只看该作者
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# N  j, @/ D) o/ B' A2 {4 d' d- v) q4 a  B
谢谢,用做临床的话,我们是不能用含动物成分的试剂的,而且现在加的都是自体血清。
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地板
发表于 2013-10-8 23:09 |只看该作者
回复 人杰鬼雄 的帖子, g6 W% n; [& x! |
& B- r3 A4 u7 S( u
请问 你用的是什么培养基

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7楼
发表于 2013-11-28 21:08 |只看该作者
回复 人杰鬼雄 的帖子
5 j4 g' U' @" t+ ?, l. x' |* N! t4 W. w# ^' `
能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看看呢?想向您学习一下,多谢了~

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8楼
发表于 2014-4-23 15:44 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子
; W) ], \$ ]. G! V- P5 T) m, T- O3 I* \
想请教一下,如何提高双阳性细胞的比例,我一直培养的CIK数量不成问题,只是双阳性的细胞太少了。可否请教IFN-g因子使用的浓度么?还需要添加其他因子么?
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9楼
发表于 2014-4-23 16:45 |只看该作者
用宝日医的GTT551,效果还不错
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10楼
发表于 2014-4-25 15:57 |只看该作者
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( B2 `$ @6 ^# d
4 v+ X. T% d- G. V; v其实现在做临床的好多也在用含太牛的血清,回输时经过清洗没什么问题的
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