请教hESC的冷冻与解冻protocal,急急急急急急

qiushuiwuhen

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  l$ I( E. [+ |5 h; Z/ e* W2 V5 U0 h$ A. k# N- U
十分感谢

希望之光

回复 qiushuiwuhen 的帖子; ?" e* B3 C4 q, P% Y
/ H3 T' u3 k! ?4 t+ k7 f
成活率挺高的呀，主要是操作细节要注意。

希望之光

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7 @& H) c# s' Y1 L- w( L
4 |& H0 u% c: U5 t; ~0 ~; c不需要加bFGF，用DF12和20%KSR重悬

孙帅帅

http://www.stemcell8.cn/thread-69628-1-1.html
5 v- Z6 P! Q5 d9 M+ Q1 O/ U我们是用的10%DMSO+90%FBS  复苏效果还不错，主要是冻存的时候吹打细胞的时候不要吹打的太碎！

waterbubble

我们用的冻存液是CS10+Y27632，终浓度为10um。

qiushuiwuhen

回复 孙帅帅 的帖子% \# [' N! u/ z7 R+ ~8 A

' e+ H4 |1 q- a3 P之前看一片nature protocal，说的是冷冻IPS用的就是10%ＤＭＳＯ＋９０％　ＦＢＳ，ＦＢＳ可以换成ＳＲ，但是比较证明克隆复苏率的情况，ＦＢＳ优于ＳＲ，准备下次试试，谢谢

qiushuiwuhen

回复 waterbubble 的帖子; C4 U8 T4 n, e! ]# v
, u0 O, W% Q1 H; X8 w. [% X# u
ＣＳ１０是何东东，没有听说过呀，是成品的冷冻液吗，并且终浓度１０ｕｍ是指的谁？谢谢

waterbubble

CS10 is an animal protein-free, serum-free and defined cryopreservation medium containing 10% dimethyl sulfoxide (DMSO).

waterbubble

cs10是stem cell 的。可以用于HESC 和IPS的冻存