求构建具有过表达基因+RNA干扰的慢病毒应用的文章

zhen022

问了一个生物公司，问是否可以构建一个可以同时表达某种蛋白质的基因和具有RNA干扰作用的小RNA，他们说不行。8 {3 u. O$ }0 j7 D$ z" n2 c, c
刚了解这方面，不知道有没有这方面的报道？这种构建方式是理论上本身就不行还是因为构建很难啊？

michaelgibh

你的意思是把它们构建到同一个载体上吗，理论上可行，实际很难，它们的启动子不同。

zhen022

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: @" O4 W9 k) U# m
. m( }' t/ k, i; L& B* _嗯对啊，这种是不是启动子有各自的系统啊？那为何慢病毒上可以构建多个标记（这些不都是红色荧光蛋白，荧光素酶蛋白之类的啊）的基因呢

zhen022

ｕｐｕｐｕｐ

zhangweihwz

这是一个载体设计上的问题，完全是可以实现的。1 n- k- Z* |5 |4 z# I1 Q
用于RNAi的载体上一般会带有筛选标记。将筛选标记换成自己需要表达的目的基因就行了。或者用IRES、2A将筛选标记和目的基因串联起来。同一载体上的H1 promoter 或者U6 promoter 后面仍旧可以插入shRNA。

zhen022

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% U/ S, p, r( M5 ]
$ |$ F; C8 V% R* J  C求相关技术文献之类的，因为问了公司，都说比较苦难达到两种基因的同时表达！

zhangweihwz

Cas9 载体不就是这样的吗。一个载体上需要表达较大的cas9蛋白，同时还需要表达gRNA。看看cas9的文章就会明白的。

goodboy

回复 zhen022 的帖子3 i" D& l8 l& k# j: ]5 Q8 Q' ^% v

$ i1 y. W# ?' ?6 D完全没有问题，我们实验室一直在用此系统。好多文章都有报道的。

zhen022

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# m0 F7 ?0 M% @& r: ~% E. _
% y; n3 a) _8 ?2 ]( S跪求几个相关文章，另外不知道你们做的效果基本如何。- i. G& v& }. [% D+ h; Z
我是真心没找到针对性的文献。

goodboy

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在小鼠上可以成瘤