CIK细胞污染

mtdj1314

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接种后24h观察，培养液轻轻晃动有一层细沙状物质，怀疑是细菌污染，但是为何培养液经18h培养后却没看到菌落？黑胶虫该如何去除呢？我使用的是自体血浆，只是没有经过56°C灭活补体，人体自身会携带黑胶虫吗？

lyj-0017

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2 h! a3 c/ F9 c. J3 e
# U& T" v+ t, `$ L1、你说的培养液经18小时培养是在平板中培养的吗？# h1 z) f# }$ R* F) o
2、我们以前也遇到过黑胶虫，当时我们的老实验技师也说没有什么好的办法，现在也不知道有什么好办法。, p& `! _, u: v. v7 I1 @
3、既然用的自体血浆，为何不灭活补体呢？大家通用的方法你们为何不去做呢？再说也不麻烦啊。8 _9 t/ \* [9 r6 o0 i
4、人体自身携带黑胶虫这个还真不清楚，但是黑胶虫这个问题貌似也没有一个确切的说法说明其到底是什么。

mtdj1314

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2 r  e% ]; u' Z4 G  i是的，平板培养的。自体血浆灭活的话能消除黑胶虫吗？

mtdj1314

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& t- r% ~- c6 ^& V8 O5 X7 E: M4 Y
7 K* q" t5 Y4 _$ o: J确实是比较棘手的事情呢，谢谢你宝贵的经验

ciweiyuan

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0 b3 I' I' ]1 K1 @& j! G5 P* }+ E. i6 _5 U
不客气，期望你实验顺利

cjq12862

除了楼上各位同行的推测，还有一个可能性：寄生虫污染，建议楼主立即找出污染源，环境消毒后重新培养。

lyj-0017

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# P" i8 T  @  S6 [6 ^1 a/ S- a不清楚灭活能不能消除黑胶虫。
" O) c* R9 ~4 i. b) J, k1 u7 t另外，能否大体介绍一下你是如何制备外周血单个核细胞的？前期处理也不能排除

mtdj1314

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寄生虫污染？可是两个标本是不同个体来源的呀

mtdj1314

回复 lyj-0017 的帖子  F8 d: m* z2 O5 B9 u* a$ T
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前期处理采用PBS稀释血液，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，然后再PBS清洗2遍，接种入培养瓶，应该是没有问题的呢

future007

做CIK治疗不是一般都需要第7天的时候送检验科做细菌培养和其他污染源检测嘛