弱弱问一句，邓宏魁的chemical ips有人重复出来吗？

iPSCs

本人四个月前开始重复邓的ciPS，确实能看到形变，最后也能看到iPS样的克隆形成，但做好几次都得不到任何Oct4-GFP阳性的克隆，老板催得很紧，一直怀疑我是哪个地方出了问题，但我确实是按照原文的方法来做的，除非是化合物有问题，但都是在sigma上买的。也实在找不出其他问题了，我也听说我们学院另一个做干细胞的实验室也没重复出来（消息未必可靠）。我相信邓实验室的水平，如此重大的成果应该是经过了反复确证才发到science上的，论坛里面是否有重复过这个方法的，结果如何？大家能否一起交流一下？？？一起攻克难关。

jessttt

你再多重复两次，一般三次都还重复不出来的话，就可以理直气壮点地发email咨询一下通讯作者了。当然你现在也可以和你们学院另一个实验室的操作人员交流一下，看他们遇到的瓶颈在哪里，然后咨询通讯作者。只是个人小小建议哈:):loveliness:

zhen022

听他们说这几篇文章都是做了好几年，历尽辛酸啊；论坛里面有他们实验室的人，期待给你们的回复啊！！！！不过说实在的，实验重复本身有很多影响条件，不光是paper里面的条件要控制好，自己的技能方面也有很重要因素。以前做iPSC分化的时候就发现，同样的iPSC，可能很小的因素影响到细胞的状态，那么定向分化效率就有很大变化。。。
- @( Z1 E0 z' a6 ]# n! D; R, d% S: a1 H& W; A/ I8 P

have-a-rest

三次重复不出来就可以理直气壮了？呵呵!
6 X9 O* A( y% ~" |实验是有些技巧的，看文章是那么个过程，作者（Deng等）也是这么过来的，那也是失败若干次之后才会成功的，所以多从自身找原因吧！

have-a-rest

三次重复不出来就可以理直气壮了？呵呵!1 ]8 K2 W( x# g$ D. I
实验是有些技巧的，看文章是那么个过程，作者（Deng等）也是这么过来的，那也是失败若干次之后才会成功的，所以多从自身找原因吧！

friendly0722

最近也准备这样做，看到大家没有重复出来，郁闷了。求交流啊。

zm19900508

没重复出来，听说了好几个实验室都重复不出来。有重复出来的求交流啊

suxiaomei

我也重复过，但是在加入DZNEp的一周的时候，细胞污染。但是这个过程中，只有SOX2,CDH1上调，OCT4雷打不动。很快转方向了。就没在继续。貌似和LZ的情况有些相似。毕竟OCT-GFP阳性只是启动子的激活。DENG用的是转基因小鼠 成纤维细胞吧。你们也是吗

iPSCs

回复 suxiaomei 的帖子; l& x* ]( s: [0 u) B
1 ]- l& F% m, ~  `7 m  r
用的MEF细胞系跟邓实验室是一样的，都是OG2小鼠胚胎发育到13.5天时分的。

murong

实验技能可能有差别，另外，也许还有什么特别注意的可能作者没有写出来吧，我觉得可以以一个学生的心态请教下教授的。