关于骨髓间充质干细胞分化心肌细胞的问题

ooocyqooo

之前没有太多的生物基础，一下子要做干细胞分化实验，有点头疼，细节的问题总搞不清楚，还请各位大神多多帮助，多谢大家！
; n: M! y" V/ o8 B) ?) D1.我要用5-氮胞苷分化，配置的5-氮胞苷要灭菌吗？能高温高压灭菌吗？2 r# l! q1 }) k2 {( y, l/ O
2.一般要冻存骨髓间质干细胞的冻存液配比是多少呀？培养基：FBS：DMSO=4：5:1？or 7:2:1？5 V; Q, n  F: W, _- \" [; c& m
3.要做免疫组化的话，选什么抗体比较好呀？哪个牌子的比较好用？
6 s' S) [( e: d: X3 l; r多谢大家啊。。。。。( S* L) C/ Y6 [1 |

chichao0000

1. 5-氮胞苷用0.2um过滤消毒；
$ f' v! |$ i6 p3 ^2. 我冻存的是脂肪干细胞  培养基：FBS：DMSO=7：2:1
/ I, u) w, ]1 Q; F6 m6 u3 |7 g3. 你是指心肌分化的marker吧，我没经验。

ooocyqooo

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4 \$ W! A6 R" d- F' u: e! J) d: s+ x8 z
多谢啦~~~

ooocyqooo

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( L& M; m& w& v3 W- p  s7 A0 A) _) s* L1 u$ R2 q
那你用的培养基是什么呀？加了什么吗8 t* d" C' f1 w; j( t( q

chichao0000

回复 ooocyqooo 的帖子/ ]' D) R3 ^8 m" G- A5 ?4 |9 N. [; p

" U& p/ A  h1 J1 V8 {我用的是DMEM-Low Glucose+10%FBS。没有加其他生长因子，我看的文献就是完全培养基内加5-Az。但是胚胎干细胞进行心肌分化诱导的培养基就复杂了，我也没弄明白为什么，希望多讨论。

ooocyqooo

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- r5 Q3 o6 i2 S3 F
0 C& ~/ _& Q2 z# a$ ~4 S我做的是间质干细胞，诱导剂是5-氮胞苷，但是胚胎干细胞就不是了；我现在用的培养基是加了FBS、双抗、谷氨酰胺。你在做什么呀。。。

chichao0000

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% C- E, p. W6 F! X& _  _. A# K1 i- x9 R
* L; M7 p; U- ], @  _1 K+ J( i脂肪干细胞，你知道为什么胚胎干细胞向心肌分化培养基复杂的原因吗？

ooocyqooo

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: e, R  r" ~4 P4 r
3 |: d/ v. }5 ~0 r6 L不是太清楚，因为当初就是觉得做胚胎干细胞太复杂，后来选做骨髓间质干细胞。是防止胚胎干细胞非定向分化吧，还要特定的微环境和滋养层，感觉看了文献就觉得好娇贵，难伺候