组织贴壁法分离脐带来源间冲质干细胞的困惑

小夏

        采用组织贴壁法分离脐带来源的间冲质干细胞，组织块游离出的细胞很少或者基本没有，求教各位前辈：有那些原因会造成这种情况？

伊诺强

你先说你是怎么养的才能知道问题出在哪里

小夏

回复 伊诺强 的帖子
/ W" F2 ]0 @- Q2 N0 X" s0 e1 L3 |. v5 G) t" |  i# s
把脐带清洗干净，剪成小段，剖开，剔除动静脉，分离出沃顿胶，剪成大约1cm3的小块，铺于75培养瓶。

伊诺强

确定是1cm3的小块？

伊诺强

培养基的选择，成分，添加量等等...........最主要的都没说

小夏

回复 伊诺强 的帖子9 v, P+ F3 y1 r4 Y7 D9 `

: p1 S+ }3 A+ ~. s0 \/ [大约

小夏

回复 伊诺强 的帖子
/ G8 _# L0 d# v1 A+ x# ~' v# k0 T6 m: a9 U9 D
   无血清培养基，添加血清替代物，谷氨酰胺。

屋檐上的乌鸦

你得剪碎组织块~！1CM3太大了

fuyinsheng

一是确定自己所加的培养基、血清、谷氨酰胺等成分没什么问题；
! t( B5 f% D$ f7 ]. ~0 j. k) M! I二是脐带消毒处理时间不宜过长，会造成细胞活性丢失% M1 K1 x- Q/ t% d
三是脐带要剪的碎一些
0 m+ B3 e: j9 K6 {* n! [四是T75培养瓶中接种时培养基加11ml左右即可，加得过多影响细胞贴壁

fuyinsheng

另外确定自己的脐带是新鲜的，放置时间太长活细胞也基本没有了