C2C12肌肉前体细胞分化问题

sszxlijin

有没有大神做肌肉前体细胞的分化啊，想问一下 我一加分化培养基分化后，死细胞会很多，分化效率也不行。

sszxlijin

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细胞海洋

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zhzliang

细胞死亡比较多，很正常。可能是加分化培养基的时间有点早了，可以等汇合度大于90%再分化

sszxlijin

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! D1 g+ i3 j: T: Q& e6 ^  B好的  谢谢版主

sszxlijin

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加分化培养液我一般是汇合度80%后的，但最近死细胞多的离谱。。我觉得有可能是细胞本身在增殖是就效果不好。问下大神 平时C2C12细胞培养有什么注意的吗？

zhzliang

别大神了，谈不上的，只是用这个细胞做过点相关的工作。增殖慢的细胞一般是两个原因：血清和代次。代次最好不要超过P18，P15以内增殖能力不会有问题。C2C12的增殖对血清有最低要求，最好是进口的胎牛血清，一般低代次的10% FBS就够了，如果觉得长的很慢，可以增加到20% FBS就可以解决问题。& Q2 q2 c! L2 l' B% c; ]
关于分化能力，15代以内应该都可以，但确实有个现象，在实验室内养的C2C12细胞的分化能力会越来越差，而且解冻低代次的细胞也不解决问题。如果你的细胞是这种情况，可以重新从ATCC买一支来，那个分化能力才叫强！

sszxlijin

回复 zhzliang 的帖子8 A% V% W1 i# ]7 x( X

8 E# n* B. r9 t5 F谢谢了   我的是这种情况   刚从中科院买来的时候分化能力可强了  养着养着就不行了。。。