培养脐带干细胞没有成功，恳请各位老师指教，谢谢您！！

听不到

感觉没有什么大问题，我做的和你不一样的应该就是于培养液里剪碎，铺到瓶里之后倒置于培养箱过夜，再正置加少量培养液，然后隔天换液基本就贴壁了，快的10天能长，慢的基本两周也长出来了。不过我之前也整过每天看，然后2周了都没长，舍不得扔，就没动，一直到20天左右的时候看爬出来很多，所以我觉得关键还是静置，别老动它

cloud100

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/ s( l6 P+ Y5 V+ j恩，好的，谢谢您！！

yongganyixie

我们一般是取回脐带，冲洗干净后，剪成3cm左右的小段，再沿静脉管剪开，剔除静脉，动脉，再撕华通氏胶，再剪碎，洗涤，然后加少量培养液直接贴壁培养，第二天补液，中间再隔几天换液，细胞就慢慢爬出来了

水念人倦

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+ l$ o/ _5 T( {7 ~0 o
手法差不多啊，唯一区别我们用的是αMEM，不过按说区别不大啊，推荐个文章可以看看。

cloud100

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( Y% u, Y9 _3 d  H- h+ v! g, g. t" J' ?  R  W: k4 \; G; S; U
我就是这么做的，今天已经是第20天了，5个培养瓶都没有细胞，而且感觉培养液颜色变化也越来越慢了，真的不知道哪里有问题，都打算用酶消化法了。。。

cloud100

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+ {8 v7 M/ G, e, J" `- d) X) o7 Z' a" ]# {" t/ ~) n$ c
这篇文献写的是酶消化法哦。。。

水念人倦

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3 D0 h! a; a, p- k5 `. n) Z( e' c/ \7 H' t7 ]  ]
是的。劳动力不足，我们正准备尝试。不过有点小贵

lovesxj941

可以试试用培养皿来养。好接种，然后加一点点培养基培养。就是刚沫过培养皿底，但是还没沫过组织块。这样就避免了组织块缺失营养。( @3 ~+ k% k! o. k, e8 X
皿也可以贴多一些。就算漂起来一部分，其他的也能养起来。

cloud100

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+ d, l1 K; E% }7 P) }2 W
2 n% ^) u2 F  E9 L% c4 ?嗯，其实我后面做的这一批，的组织块贴壁蛮好的，我也很少移动培养瓶，不过就是没有长出来。组织块有大有小，应该也不存在体积过大或过小问题，实在不明白为什么，打算尝试酶消化法了。

yongganyixie

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& m  i2 g! f! n) {8 j! Y' Y: X. `+ d7 B
你中间换液的时候，倒掉的培养液粘稠吗？我们一般这样养的话，两周左右就出细胞了