手采集外周血培养CIK疑问！！！

lyj-0017

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采集的外周血离心后，分离出血浆，剩下的不就只有细胞团了吗？再怎么按照1:1加PBS稀释？

lyj-0017

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3 M3 Z/ P$ b9 T3 P# ~' @混合的时候，有没有可能加入的DC细胞太多，部分DC细胞因接收不到生长信号而凋亡？

lyj-0017

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  W5 a0 t# x6 z1 i- g" [: Q首次铺瓶贴壁时，加入培养瓶中PBMC的密度一般控制在什么范围之内？分离出来的悬浮细胞再次装瓶的密度范围是多少？

aochongyu

以前比较过先离心外周血再加盐水稀释和直接加盐水稀释，感觉先分离血浆得到的单个核更多一些，并且省分离液

lyj-0017

回复 aochongyu 的帖子  f2 r( P. q6 ?% _1 l6 X$ o
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我个人也感觉先离心外周血再加盐水稀释会更好一些，无奈领导执意认为后者好~

levell

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剩下的细胞也是有体积的啊，按体积加入PBS就好啦

levell

回复 lyj-0017 的帖子) I) d; x8 r" U5 ]0 W( R  n, [
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首次贴壁时候将单核细胞调整为2×106/ml，2h贴壁后移出悬浮细胞，调整浓度为1-2×106/ml，以经验来说就直接移出密度就合适着呢，不用再处理，直接加因子就好

xyz2120091064

个人认为先离心富集红细胞再稀释，这样不仅红细胞多而且有自体血浆

lyj-0017

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; W7 i& \; E1 ?8 FOK，非常感谢！

lyj-0017

回复 xyz2120091064 的帖子) f& i7 U: }- c
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自体血浆不是已经离心去除掉了吗？