用什么牌子的淋巴分离液分离脐血单个核细胞？

cjsbaicai

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脐带血和人外周血的细胞密度是有差异的，所以按外周血中白细胞分离步骤，肯定会出现红细胞的。所以一般在分离白膜层后需要进行红细胞的裂解。0 R+ w  o" X  N( Z0 ~* ~: o' w2 k

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小梓莜

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, K+ Z! c  l- T6 P) J  M好的，谢谢您的指导，我去查查~

dchingb

雖然我沒做過臍血，只做過外周血，但建議您可以以DPBS或生理食鹽水與血液等體積稀釋，再load on到分離液上，分離液廠牌為sigma，另分離液溶液密度有分1.077、1.083、1.119g/mL，不曉得你用的密度是多少?

chenlin080102

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2 B) J! g. n/ ]& h) v脐血里面很多是未成熟红细胞，它是有核的，所以对红细胞裂解液不敏感，同时它的密度又接近白细胞，这就是为什么分完之后和白细胞界面不清晰；成熟的红细胞是无核的，且比白细胞大，所以能分开，建议你采用3%明胶沉降分离的方法，这个是经典的方法，脐血库一般使用的，可以找到相关文章参考，我试过了效果不错，另外就是市面上没有针对分离脐血的分离液，所以可以自己再优化，希望对你有帮助！

小梓莜

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: ~0 y2 x9 Q" P; E) I& H' _! o你好！我有用PBS等比稀释，分离液为1.077g/ml。

小梓莜

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8 G6 }1 U+ ~! o  ^/ ^3 p谢谢，我再优化条件试试~

小梓莜

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: J1 V2 a6 h$ C! w# c% g  p谢谢，我再优化条件试试~

biluolinyu

回复 孙帅帅 的帖子
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2 H$ P- B  K% ?5 j$ X: w请问下，灏洋的分离液用的是医用级还是科研级的呢

3254938

可以先用明胶巴未成熟的红细胞也拉下来，再分离，效果非常好。时间长短都行，您可以试试。。。有临床级别的明胶卖的。

魏夏媛

我们都是用明胶先沉降然后在分离，效果挺好