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楼主: 听不到
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求助,关于脐带间充质死活爬不出来...   [复制链接]

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31楼
发表于 2015-6-5 12:49 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 baicaikua 的帖子6 }  k2 r2 ?" d& y/ J/ @2 [, ^9 Z; \
: `; X3 m1 f7 A  ?
类似果冻状的,稀释后没用枪头吹

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32楼
发表于 2015-6-5 12:50 |只看该作者
回复 309208770 的帖子  d- C& l- X+ i2 p

2 H) m6 ^: ?; t" K8 D促使贴壁嘛,剪的时候往里加点培养液,加一点就好,加多了会导致倒置的时候组织块掉下来
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33楼
发表于 2015-6-5 12:52 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子+ v  W+ k8 t  X% W- @
  K) k7 E" F& I, F
我和你不一样的就是种瓶后倒置过夜,然后第二天再加培养液,其他差不多,以前也是10天基本就长出细胞了,但是这次不长...话说你用的瓶是塑料瓶还是玻璃瓶?
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34楼
发表于 2015-6-5 12:53 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子' j4 P8 D2 `. X
3 }: r& y! S; M
那你看我之前发的具体步骤上有什么需要注意的吗?

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35楼
发表于 2015-6-5 12:56 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子$ b% w1 o* k& M/ I

) t5 E& `% T  E& c- T) _/ h应该不是,培养箱是实验室公用的,别人都没问题,不过他们养的是肿瘤细胞

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36楼
发表于 2015-6-5 15:26 |只看该作者
回复 听不到 的帖子
$ w; t, G8 y/ R8 c: x1 S
/ ~3 ~" j9 K8 c+ R" b( v# J既然你原来的操作都能养出来细胞,就证明应该不会是操作或是培养基的问题了 很可能是标本本身的问题,说实话,我们实验室也不是每份标本都能养出来,每份标本都有个体差异,就是说很可能有的胎儿脐带活性很好,而有的活性就很低,还有就是脐带采集过程中有没有什么问题 比如采集后暴露在空气中时间过长 影响脐带细胞活性等。
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37楼
发表于 2015-6-5 16:01 |只看该作者
回复 听不到 的帖子+ |" c! L& Q, K# w
' O% t$ H( C* U& L
用的是NUNC的塑料培养瓶,既然你以前倒置培养过夜培养很正常,那这次有什么变量因素吗?比如脐带来源个体是否正常,运输过程中温度、保存液是否正常,本次使用的培养液是否检测正常?
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38楼
发表于 2015-6-5 16:29 |只看该作者
回复 听不到 的帖子- _2 @  f# F! V* ~% u. [: |; [

4 q+ {2 j8 _" w  C3 r, b有没有去除脐动脉?
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39楼
发表于 2015-6-6 11:00 |只看该作者
回复 听不到 的帖子
& X" o6 s$ n7 w/ Y
, P2 Z  A8 d, n6 ^# O9 ~% R# i3 t你的操作步骤我看了。不用倒置过来。这种倒置的方法早就过时了。你就把剪碎的组织块接种到瓶里(组织块大小合适,培养基添加量要合适),还有就是不用加什么双抗,用酒精消毒一下就行了。我都做了好几千份了,都没用过双抗,污染率挺低的。
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40楼
发表于 2015-6-7 10:51 |只看该作者
回复 caustic 的帖子$ Q/ Z! k2 e9 X0 |

( r7 i2 U% a" Z我这次是一次性做了三个人的,所以我认为不应该是个体的问题,至于采集后应该是放在4度保存了,然后师弟去取的
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