转染基础知识手册——Life Tech出品

dahui

目 录9 C( J  f8 f0 L/ g
转染选择指南和转染决策树 . . . . . . iiii
4 Q. h. |. I8 `0 P# s1. 简介 . . 1
5 G7 \$ i2 [3 ?8 T, _) Q! E, j5 q7 K2. 转染基础知识 . . 2. e- ~9 ]& ]0 J5 a/ I
转染介绍 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2/ v$ {! }( v: K( ?5 P6 R% n/ Z
什么是转染 2
* c' ~; c. b. J3 h/ S术语 2
' a6 U# Y: a- V3 l2 O应用 3* y6 G2 Y& B. @9 y/ D5 p' a
转染类型 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4% i) b0 q; Q# b2 A1 ?" ^, ^0 y
瞬时转染 45 t8 J, V1 j, O8 j+ H, q" A7 v
稳定转染 4/ w' U) `; b- _7 L+ v$ Q1 k
选择转染策略 . 59 M- ]. u7 M2 p0 d8 j" Y( P, _8 l
基因输送技术 . . 76 U2 D+ F; B+ r
阳离子脂质体介导的输送 93 E2 v. K: X) l' t5 X
磷酸钙共沉淀 10
8 M  m+ [" W& }# IDEAE-右旋糖酐介导的输送 . 11
7 l. @+ @: Y3 K" O: B9 I7 K其他阳离子聚合物输送 . 12* f( j1 K4 [! e6 b/ \( I
病毒输送 13' q+ f" G9 i- m# V7 D, g# P0 f9 \2 ~
电穿孔 . 146 h5 ?3 }' c( H/ t" a  j
其它物理输送方法 . 15; m3 {! M- t' I! k
阳离子脂质体介导的转染 . . . . . . . . . . . . . . 16
) a% g" ?0 C9 [5 m机理 16$ q2 v8 U7 t7 i# H7 s. z4 a: J/ f9 `
阳离子脂质体转染试剂 . 17! C& X. f% J- `
病毒介导的基因转移 . . . . . . . . . . . . . . . 19) ]% c4 n: @: s) ]" t
病毒载体的主要特点 . 19' W% n6 g) {6 G# a+ I- l
常用病毒载体 19  p" R% I9 k: ^. q3 q! d, S
Neon®转染系统 . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21
; z" k& q  V) k8 A7 i2 E稳定转染子的选择 . . 23- }* ]9 {' v* P! U+ e
用于真核细胞的选择性抗生素 . 23
$ y5 C0 |; \) J" E+ }- g7 x, o报告基因分析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
4 R" }. J7 [8 v  M8 j2 `转染分析 24. X! V& ?1 m4 Y0 h8 `
基因调控分析 25  U  Y" x& B. |" u7 H
常用的报告基因 25
# K/ P. v6 x  L" ~RNAi和非编码RNA研究 . . 26
, d# l1 X. E% |) N0 Z2 p( [( G% q常用RNAi术语表 . 26; a; G8 r7 [* @. o, s
RNAi工作原理 . 272 H  t: Q7 y) w6 S2 G) I2 x
siRNA分析 . 27
" S3 n) B0 b) ~, e' A+ ]4 e8 omiRNA分析 28) q# b. C% a4 n0 l
选择RNAi方法 . 29
2 }/ x  I8 W0 f: l; T: ?% z) ~, Y3. 转染方法 . . . . . . . . . . . . . . 30+ Q. k! f3 p" N4 \4 k: F
影响转染效率的因素 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
  S. L0 L+ x: N, t4 b0 B% B细胞类型 309 K2 _) f6 u4 q1 ~! A8 T  i1 e
细胞健康与活性 31/ l8 m0 s$ x  s8 D
汇合 . 32
2 Z' a& T' Y# ~培养基 . 321 k" q% M$ ]9 n4 j, N* `
血清 . 32
# C- {, w" X+ T9 G1 C抗生素 33$ L3 C$ M9 F6 e4 `- V/ G3 i
转染分子的类型 333 ~7 H8 O) `; s8 n1 H0 V( Z
转染方法 335 l( |* ]4 w5 R# V  ?- S
选择转染方法(非病毒) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34, `6 q( B1 q4 o/ P
连续细胞系 . 34" v7 u" ]: N& V8 g+ r
原代细胞和有限培养物 . 35$ ]2 L5 r. K( {. k0 t
选择病毒DNA输送系统 . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36$ l: i, l) ]' A) [* a
哺乳动物细胞表达系统 . 36  s( _# j/ w) F& Q+ _7 B
昆虫细胞表达系统 . 37
9 R( L- U# u7 t; w质粒DNA转染指导原则 . . 38
* @9 \- L( w% r/ w5 H3 z7 s- d载体考虑因素 38/ J9 p0 i& n7 v' D' O' `# m
质粒DNA的质量 381 Y0 ]: g, ]) l- w2 @- h
基因产物和启动子 . 39' `# R+ N  V) k$ z
对照 39
, }9 d7 y6 h7 a, l( t8 J! D质粒DNA转染的优化 . . 39
- k5 Y. _# d3 `) _) z" `磷酸钙共沉淀的考虑因素 . 40. P* b1 o5 O- k5 C
阳离子脂质体介导的转染考虑因素 41
- N& u- K2 W5 R. R5 g4 H% d电穿孔的考虑因素 . 43
5 Q3 ?! _: m3 T4 ?9 Z$ V稳定转染子的选择 . . 443 V" ]0 O* ]: r$ D  N+ K
开始前 44! o# w# z' t8 `5 r
杀死曲线 44
3 h: A! R! h" _# O2 d* o6 Q; ]选择工作流程 44& o; a  G; F" v
选择RNAi策略 . . 46' O! ^: K8 b- S) o
siRNA与载体方法 46% U5 }! \0 L# P7 J" v3 [
非载体siRNA技术 47
+ w% u( P- Z' ^( e& W# _siRNA转染 . 49( _' X8 ?6 H  e2 y6 y
载体介导的RNAi . 508 S: }' ~! E, s8 l3 c2 O
RNA转染指导原则 . . 51
: B. a3 q- z2 }% C2 NRNAi工作流程 . 51
8 l7 h1 H) j7 N8 C: r: SRNA处理 52" _! k, ~" U: N& U
转染效率 52
5 h( r' w& z. O( {7 Q. g阳性对照 . 52
! o( V1 C; |* t# E& D4 |6 u8 O% w  ?阴性对照 529 T$ ^  Y; b  I8 [' Y
共转染 53; y+ T. X  [7 C& g
siRNA质量 . 53
" B* H# x) b# m2 X6 ssiRNA用量 . 54
8 h( h, F) O- l3 V3 S转染试剂的体积 54
9 C) i% N/ M1 T0 O: `+ n细胞密度 54
% [6 e* ~; [4 t. b+ N5 v/ g暴露在转染试剂/siRNA复合物中 . 54) G& v, r; v+ _  W9 Z
转染过程中存在血清 . 552 V) R% J0 K# V# M: i2 _8 l  h
siRNA实验成功的技巧 55
. d& M& r, r0 `8 vsiRNA转染优化 . . . . . . . . . . . 56! @+ R3 q- E; z" e# Q( q
影响siRNA效率的因素 56
; \, \6 P& v" O3 S! b附录 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 578 Z; L' S5 h' U" k# m6 M. F+ m
转染产品列表 . . 57
8 c% e( u, M1 @: L8 H/ T转染试剂 57
4 x5 s  {- h9 T0 r' ^* L5 ]Neon®转染系统 . 58
! n* m% ?, m' @" q7 P' L$ mRNA干扰 58: `2 y( i/ @( ~% `6 i
参考文献 . . . 59) G$ ~8 x  g! u. n9 c

游客，如果你要查看本帖隐藏内容请回复

chenlin080102

谢谢

天使心3420

非常感谢

Ernest

谢谢分享！

daviddow

谢谢

chuanbaozang

很好的资料，收藏之

xnyyswzl

englishjane

谢谢

强威

多谢了

强威

多谢了