CIK细胞培养补液

colins

接种密度太高，按照的你的接种量那得需要多少外周血啊，哪个医生也不敢抽这么多血啊；转袋也太早了，转袋以后补液就行了，简单方便，你转袋不就是为了大规模培养方便，可以倍比加液啊

gondobar

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; R; l" A/ h( W* }( A2 `- y- O) i' c8 A8 P! n1 [7 M
1.做流式一般回收时候做，不用培养液。PBS悬浮1*10·6。具体看流式细胞仪要求。  ?+ D9 b5 {* i
2.培养过程中补液一般控制在10·6次/ml,补液看细胞密度和培养基颜色。

eeel

补液 主要看细胞生长状态，比如CIK的抱团大小，培养液颜色变化情况，红〉微红〉微黄〉黄等，以及细胞生长阶段的不同。虽然有客观指标可依据，但是在操作中没有直观的经验来的实际、可操作性强。

fsj1987

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4 B, {! v* ?* T& P( c
8 s* w0 I, T8 V( ^培养的样本是健康人的外周血40ML，那什么时候转比较好啊？

fsj1987

回复 gondobar 的帖子  K3 N/ j! V% T7 N* k
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我今天做得流式，要求1ML，但用的是培养基稀释的，细胞悬液细胞密度控制在1-5*10的6次方，不明白为什么？

colins

回复 fsj1987 的帖子3 g5 {/ f' F  J& I, q% _5 E

4 n' a3 a' r; ]我们养的是病人的外周血CIK，接种密度一般控制在每毫升6次方左右，根据生长情况大约3天倍比补液一次，T175的培养瓶装60mL的培养液不成问题，健康人的外周血可能会长的快一些，具体什么时候补液需要经验指导。希望对你有帮助

fsj1987

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: P5 R  ?6 O, J$ g% T您的意思就是从接种到培养结束始终保持密度在10的6次方左右就可以对吗？不知我是否可以这样理解

gondobar

回复 fsj1987 的帖子- f7 @0 F" {) W+ O3 v0 h% _2 p

0 w* f6 N* u6 q流式细胞仪要求的检测范围大概就是1-5*10的6次方。1mL这个数值是无所谓的，进样量比这少，但是一般给个几毫升无所谓。

colins

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* P0 k/ v; U+ ?+ @' d( l9 W2 Z4 t3 W9 [
是的，基本上都在6次方左右，感觉养的还不错

fsj1987

学习了，谢谢大神们。明天发个流式结果大家帮忙看看