干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: fsj1987
go

CIK细胞培养补液   [复制链接]

Rank: 1

积分
31 
威望
31  
包包
146  
21楼
发表于 2015-7-16 16:40 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 gondobar 的帖子! C9 _4 W* S: T6 w: o0 z) B& q5 d- F

% [5 S# }1 f' D( F% s) i我的原液达到10的9次方,做流式的说10*6到10*9次方都可以,那我直接用原液不就可以了吗?是不是所有流式都必须采够细胞个数10*6次方才可以啊?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
468 
威望
468  
包包
1873  

金话筒 优秀会员

22楼
发表于 2015-7-17 08:57 |只看该作者
回复 fsj1987 的帖子
- j: ?8 s. E) W' V2 I
# z1 g5 J# ~) L5 B) H* V淋巴细胞亚群测定7 N4 O) a! e5 H5 ^1 h* ^* M* h! m
原理:双/三色直接免疫荧光法。荧光素标记的各种单克隆抗体加入到全血中, 与白细胞膜上相应的抗原结合,经过溶血、洗涤(和固定)等步骤后,在流式细胞仪上进行分析,从而得到淋巴细胞亚群的百分数。淋巴细胞表面抗原分布如下:T淋巴细胞:CD3+;B淋巴细胞:CD5+,CDl9+;辅助性T淋巴细胞:CD3+CD4+;抑制性T淋巴细胞:CD3+CD8+;NK细胞:CD3-CDl6+56+等。根据淋巴细胞膜上CD分子表达的不同,流式细胞仪可以分辨出淋巴细胞及其各种不同的亚群,利用计算机软件计算出淋巴细胞亚群的百分数。 3 B: }. U* m+ @& g8 ~0 r# l
要求1.样本量至少1ml。
' X3 w- u! K, f$ B1 G; v+ h8 F+ C2.样本应在采集后6小时内处理,冷冻的标本不能用。
( V( `7 e' b  r3 a# k0 q3.样本白细胞计数应在4.0-10.0×109/L之间。若>10.0×109/L,样本需要稀释,用PBS稀释;若<4.0×109/L,应分离单个核细胞。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 1

积分
31 
威望
31  
包包
146  
23楼
发表于 2015-7-17 16:27 |只看该作者
[img][/img]

Rank: 1

积分
31 
威望
31  
包包
146  
24楼
发表于 2015-7-17 16:55 |只看该作者
怎么才能上传图片 啊
7 i7 f5 K: f- K/ P' ?2 Z0 o

Rank: 4

积分
1006 
威望
1006  
包包
4400  

金话筒 优秀会员 帅哥研究员 美女研究员 小小研究员 博览群书 热心会员 积极份子

25楼
发表于 2015-7-18 15:18 |只看该作者
简而言之,就是根据细胞密度进行分批次的补液,一次补太多会导致营养过剩,补液量不足又会导致细胞由于营养缺失影响其生长,补液就是你饿了吃点饭,人多了饭就多做点,人少了少做点
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3650  

小小研究员

26楼
发表于 2015-7-20 09:47 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-7-20 09:48 编辑
6 _/ A' c* k  z$ v/ B8 K% C# G* E0 s7 }- L3 l8 |- ~
回复 fsj1987 的帖子. y8 t) f8 _# o# d# ?

1 q$ [+ c8 G% H5 B6 R" w/ j$ {发帖 或者 回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb$ B. a( H7 K% n2 [

Rank: 2

积分
211 
威望
211  
包包
640  

优秀会员

27楼
发表于 2015-7-20 10:12 |只看该作者
回复 fsj1987 的帖子
+ w% p; n5 ]; V. A$ |4 X6 L; p+ J/ {4 {# T
CIK换液一是浪费,二是不现实(后期量会特别大)。细胞密度当然是计数了,补液多少也是通过计数结果换算出来的最终浓度来补的!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
541 
威望
541  
包包
2372  

金话筒 优秀会员

28楼
发表于 2015-7-21 15:45 |只看该作者
都是补液,一般不换液的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
3 
威望
3  
包包
31  
29楼
发表于 2015-10-19 09:27 |只看该作者
主要是根据细胞的密度来补液,主要是靠血细胞计数仪,感觉手动计数结果准确点
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
134 
威望
134  
包包
469  
30楼
发表于 2015-10-19 11:06 |只看该作者
回复 fsj1987 的帖子
6 g1 E6 I. m  {( p' y( k+ b, w5 i4 |% a* ?# Y# F6 `: M
CIK最好是补液,如果真想换液最好离心再加液,你只静置细胞再换液,容易造成细胞损失。& Z! Y& P( y5 |3 Z0 R+ x! F
1.流式一般在回输当天或前一天做,看你时间安排。流式一般每组至少1万细胞,太少的话误差太大,收集的细胞越多,才有意义。取得培养液看你的密度。
" Q" U" ?7 \" O; u( C' m* [2.培养过程中,一般调节密度1.5-2×106,根据计数调节培养体积。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 6 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6  包包 + 15   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-10-18 17:55

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.