CD3抗体包被vs直接添加

醉心科研

关于CD3单抗是包被好还是直接添加好，论坛里已讨论过好几个帖，这里不涉及这个问题。
  d3 x" l  a: B) v( z就是有一点不明白，包被是接种之前就包被好了，而直接添加是伽马诱导24h之后加的。那么这两个时间点不一样啊，哪个时间添加更好呢？

繁华落尽

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4 I) S, p, i; C
3 ?7 K  n4 b; u这个实验我们做过，CD3正常包被的时候都是在接种之前包被，时间大概为接种前12h，包被的效果和不包被的效果没什么区别，唯一就是包被后的细胞，前期易贴壁生长.另外也可以采纳用血浆包被或者是纤维连接蛋白FN
/ T2 ~, ]8 s$ T, l: D8 O; R

Sarge

效果是差不多的，包被太费抗体

醉心科研

可能我问的不够清楚。我关心的是加入时间的问题。
7 Z- N+ m* W( f9 g+ N按照包被的时间算，相当于在接种0h时加入的anti-CD3，而一般加都是24h后再加。这样算来，是不是直接在接种时加入溶解好的anti-CD3也行呢？

zerollx

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: h" V$ [7 C& i0 A# A( [: M* m1 t
添加可溶性抗体CD3和CD28的浓度一般是多少啊
; H4 P0 w6 O% H% Q. u3 h

Sarge

浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的

Sarge

一般是在50-100ng/ml

Sarge

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! Z) k7 |0 c) V+ {' d. c5 q1 A2 S4 J

3 h, w6 b6 t+ L1 C# q* F浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的

a276038921

感觉包被的细胞后期生长的要比直接添加的好，而且不容易结团

baoweih

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- S3 V  j/ b! ^7 I) N, K" W, M
可以接种时加配好的CD3培养基，两天后再加含IL-2的培养基，这种方法细胞没有包被的生长得快