间充质干细胞的流式检测

SKC-SFC

看过一些关于脐带间充质干细胞的流式检测的文献，看到很多都是每个marker和CD45在同一管内进行检测。为什么不单独检测CD45为什么每个检测管都加入CD45呢？要是造血干细胞的话是为了圈定白细胞群可以理解。但间充质这么处理不是很理解；另外间充质干细胞的FSC和SSC的散点图中的R1门怎么圈定。造血干细胞的画群是先圈定淋巴细胞群。那间充质干细胞呢？

SKC-SFC

一，比如除去同型对照管外。举例三管。1.CD45-FITC+HLA-DR-PE+CD73-PerCP
/ c( Y0 \7 m9 ~3 J' L& j) I7 M                                                        2.CD45-FITC+CD29-PE+CD44-FITC; m% z; F" Z. ?. d) q+ H
                                                        3.CD45-FITC+CD34-PE+CD105-A（单阳管比较浪费）5 M# \1 V9 {8 n  B/ H7 U; t, J4 R
二，造血干细胞的分析前，在FSC/SSC散点图中，圈定中间偏底下那个淋巴细胞群。那间充质呢？直接圈定去除杂质和碎片之后的那一大片？

SKC-SFC

希望得到指导。帖子不要沉。

yingfeixiang

间充质干细胞检测没管加CD45-FITC干什么，按表达的正常话，CD45-FITC表达小于2%的，按你说的protocol好像没什么意义，浪费抗体。另外做脐带间充质干细胞流式，这个是你培养的细胞吧，细胞成分单一，基本上在FSC/SSC散点图中（去除杂质和碎片后）都是间充质干细胞。

SKC-SFC

嗯。我们是P3代之后的脐带间充质干细胞。散点图那个我和您想法一致。造血干细胞的话散点图中需要画出淋巴细胞群。我是看了好几篇文献里都会加入CD45 我们以前做 没有每管都加CD45。也不知道这些论文里是什么个意思

SKC-SFC

回复 yingfeixiang 的帖子; i# b9 a( V  I  o! M7 f& X

% n# ~; A" _9 \+ z嗯。我们是P3代之后的脐带间充质干细胞。散点图那个我和您想法一致。造血干细胞的话散点图中需要画出淋巴细胞群。我是看了好几篇文献里都会加入CD45 我们以前做 没有每管都加CD45。也不知道这些论文里是什么个意思

yingfeixiang

回复 SKC-SFC 的帖子
. P+ n7 X. Z% r, \5 C2 l1 O
  x3 u0 w% z1 _, y: u不知道你看的是什么方面的文献，文献里面都加入CD45的话，是不是检测的是脐血里面的间充质干细胞含量？那也不对呀，也不应该标记CD45呀，这么做也不对呀，不明白呀。

SKC-SFC

回复 yingfeixiang 的帖子3 @. q: S6 H/ d# D/ z9 ?. q

5 r, c$ T# r6 ~您看看这个% p% S  s9 a" ?7 h
http://www.doc88.com/p-7456857376676.html

yingfeixiang

回复 SKC-SFC 的帖子. u6 u% V4 _; C2 M6 `4 s( `

7 Q; y& ^9 M: l4 c( [$ l5 ]- k+ x1 D2 K看过了，按它这个方案也可以，浪费点抗体就是，4色的检测，方案复杂了点，设门的原理不一样

SKC-SFC

回复 yingfeixiang 的帖子0 r, ?: r( `2 m$ ]5 O

! H4 e! s+ W3 i$ `+ X) g5 ~按文献这么做该怎么设门呢？谢谢