大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗
  }$ f/ |. q0 K0 W6 m. k6 Y/ `# u( v: z9 R/ U
   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液
# M; B$ \( |/ b6 p. ?9 C6 J也有人说 * m( ^* l- n0 ~4 X& V% ^
   爬片之前用0.1％明胶涂玻片
& e8 ~; d+ o& T0 d8 p  F9 H! u( q4 T" o" n8 r- E; a% r7 t  o
大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，
8 A; i' x. l5 ^. `5 C3 z          2.细胞得沉降到附着物体表面4 }: @3 c6 N5 r  B* t& E
          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。& u$ x9 ^; U2 D. `$ H* V/ z
另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

- X* a# R% T) C

- Z5 V+ A* I5 f* }如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。
# Q. n5 F6 @3 v: D* `, O! H1 Z6 o) G
   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。7 i& h( w/ o" @$ u
   / ^, o) J1 ^# S- H
   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；
; k4 e: b( E7 {7 x- }* k2 E+ {层粘蛋白，这个没用过；
3 \' W* Q) X9 [' t胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。  v6 w. O. `4 U( z5 [: X
个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行& _# ?9 `0 \9 _  ?/ g  L1 S+ ~
我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，, m0 L  R, \$ h2 v; l
如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，* K; W: p7 Y* a& k
这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。