大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗
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) H& R! e, {, w; }- _9 U+ L   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液) s  q& w: B4 T$ s) q4 \0 ?* F
也有人说
# o( [: F( d: C4 a   爬片之前用0.1％明胶涂玻片
0 t% u" {% Q' V0 b$ h0 {7 o0 y+ }4 s) {& i/ F$ T9 W' [+ v
大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，
$ {1 y) R% H; F' n" U3 T          2.细胞得沉降到附着物体表面& k1 `8 {7 o  m( |( d: X( e
          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。1 ^! J5 S2 F- D* U. `
另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

/ K; u6 B& B, [3 r( m
9 o) p1 Q2 n$ D. \3 N. [; I
如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。
! ^6 d$ m* N/ ]2 D* P) O3 ^! X' b* {- |1 g4 p1 U- |9 |
   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。
' X0 F- h  p* c- q   
7 U2 e. h* r( U# p3 Z! Z6 A: i   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；: X+ Q. ^8 M& P6 |8 d
层粘蛋白，这个没用过；
5 {' r3 F# \$ ~3 b7 Q胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。' N, k( u! p, v+ v: K5 Y
个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行
& I% n6 S$ ~2 o/ s7 g我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，* N+ j6 r1 q$ H+ s
如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，
6 p5 D2 ~2 t. ^- J这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。