大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗5 x& h' S" I. Q% g2 O

7 R0 R( ~. U$ F& ]% k, o9 G   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液
, r% ?+ A7 Q% `8 U% Q, I5 Z* L1 J也有人说 1 t/ x5 C0 m: S& A5 [: e
   爬片之前用0.1％明胶涂玻片
% o0 A' r% y" j3 Y3 `+ A; q+ r( Q4 E$ W( q4 _
大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，
/ L! p7 n9 L! |/ u          2.细胞得沉降到附着物体表面
3 C1 q9 G* D8 ]& @8 I          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。
# \$ w. ]. |9 P# @" s. L; n/ N另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

4 }  A: I5 I" ^; {* v2 M
% ~& p2 I, N+ p  _) M' [7 n7 U: z
如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。+ d, B! L: G. P9 Q. L

! ]- n# P! s2 i- H   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。$ i4 n0 _% R  I1 q; \$ S1 Q$ z
   , `9 K( a, ?+ {- G/ r
   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；1 L5 I# ~* I0 t1 m/ K5 @
层粘蛋白，这个没用过；
5 @2 _& ^& W9 d胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。
% G# g: }3 B  I: c个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行
+ I) X. W( j6 ^, o; `我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，/ }. r8 v5 K  x* P1 F, n: b: r
如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，
# I2 q# b, }6 j* y. k) ^这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。