大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗
" V# O8 j+ ^! {, k: L+ o& d. A
5 p" I0 q9 _+ ]2 [7 z   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液( G  c. [! L4 B9 h& F; ~# `
也有人说
7 V* j2 f& I3 x6 k' ]1 J   爬片之前用0.1％明胶涂玻片
0 Y( q1 e, y! U8 Q" a& R# w: C; {
# m" }5 Z/ y( H& {- A2 V大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，
( ^: `& P5 A) o. \          2.细胞得沉降到附着物体表面
- \4 V* c3 |& G/ a9 \% S6 }, G" P          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。4 E# {, d. T; t! r
另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

5 T% Q2 _- S, T1 n- w4 A0 h# T2 r3 d% u
如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。; R, I3 K6 A" r/ I  b0 A$ ?+ ^
& Q% o5 J; C$ T
   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。
: v$ ^# ]( r; V0 `/ r+ r, x   
( r) f) O, P$ c   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；
+ n) Z# `9 R' H2 |层粘蛋白，这个没用过；
+ T/ n/ o5 J9 O- h) @胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。9 a# v; j# K# n* B- N" f
个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行- L+ O. y4 h0 M
我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，( F1 s( r- p. G# A$ p7 v7 Q
如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，
- x6 e: E6 o9 C- j- m这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。