大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗
8 b5 L7 r# ]6 ?, W7 J! e+ D7 Y2 S0 W2 d& _& ~: v
   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液
9 }: |. ]9 `5 j. J) f也有人说
" h1 a" h2 c( s3 l# n   爬片之前用0.1％明胶涂玻片; R! a5 S: u( a! [1 c

/ d- Y) M3 q% Y! V# a! X7 z大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，1 t2 D  [8 \8 P5 {
          2.细胞得沉降到附着物体表面! `( O8 }! A  N. s" j
          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。
& h6 |0 d% L+ y6 u; E0 a另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

3 [8 _: `8 t' M6 f) X

" k* ^, X5 B; `0 x$ L9 I如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。) g7 F) p, s' M% z% U8 D

( V" m6 e6 e: Y* B   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。- g/ T5 k! X$ V; @3 Q8 f
   
  P' h% _; a) y: b   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；  X- d2 J) V1 b# P: d! s. E
层粘蛋白，这个没用过；
& S* X2 d' D( _8 U6 S. l' @  g0 K0 e1 J% s胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。- q0 e0 v4 f7 `: U& y3 d
个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行
6 ?9 R2 j: E* f' o$ Q我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，
" O% Q& u6 W/ \2 H6 v# i如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，
, `: V! y4 i/ Z" f' x9 i4 q这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。