大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗& N3 N7 [5 p$ s7 O
: y# }& k2 Y8 j" p( c% U
   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液
* D9 o7 ]! A8 P8 Z( O  _也有人说 ) B+ N" G1 {7 {6 }, |
   爬片之前用0.1％明胶涂玻片
, h5 W: e9 q/ P$ N2 J
! N3 {. H: _. s3 V, l4 C大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，
% X3 O( m# Q" o/ @8 [          2.细胞得沉降到附着物体表面% R- _. N* |3 I
          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。
: m, n4 V2 S' L& m5 S6 R) K& G- _2 Z% m$ B另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

: A5 I2 A4 t3 m7 O7 O* E/ S
, i( C5 |6 l+ _3 _如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。
* S+ X. F: f: S  R3 W5 }+ Z  a/ N. u* R
   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。
6 k$ h& _, l9 g  V$ i# E" \   - a1 x6 S1 A+ Z6 I
   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；" s4 }" ]) e& z) j% {: r+ p
层粘蛋白，这个没用过；* j" ?* }- |1 @5 F
胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。
& d. n- ?& Q3 S5 G个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行
" a- K5 [5 s2 x, m1 m/ r+ T我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，
$ ]/ e+ T4 E# q" b& ~如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，. g9 l1 U2 q% E' l9 {7 {0 P& H
这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。