大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗
$ Q; @/ p& v; O" |( i& B, F
- U' R' t: E$ p0 B   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液
1 }' c& P3 ]/ d- R. d也有人说
; K% i2 s( V0 x! e   爬片之前用0.1％明胶涂玻片' H; E2 K7 ]$ n7 O0 z4 J
" ]! p5 Z8 G& y9 p
大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，( ?& c! g% @1 G+ W. |: }! C
          2.细胞得沉降到附着物体表面
( A% G  G- H1 ~          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。
, z2 g7 I+ }- J/ U2 g& _" b另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

) ]. s. O1 A( R
: r* U1 a7 e& `6 n2 x+ l! N如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。
  I- E  {  L6 Q/ \! z: X
9 Q0 d# v; V& T6 d4 W5 R   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。- [! F0 D/ h' M6 ]3 W9 t& v
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   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；
; G8 k( {* J* g6 e1 m$ t层粘蛋白，这个没用过；
" k* z% l& D/ F8 d/ a4 h胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。3 \' V0 P& W- R! B
个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行
' s! J1 ?9 b, I. V4 d, F" i" `我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，
, ^* N# T! ?) A# ~. h. ]  b如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，
" Q! x5 n( g2 y/ k  a: ?. D这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。