请问Hela细胞该如何养呢

笨鑫

hela细胞该如何养呢？动物细胞和昆虫细胞培养时有那些不同呢？5 _. z( s6 N: w' t
       我刚开始培养细胞。, Q; P) h7 Z* R1 b8 v2 I
       谢谢大家！

小鲁鲁

HELA细胞虽然用的多，倒不是很好养，主要是贴壁不紧，换液的时候容易脱落。
2 X1 d, t0 [9 R# S3 |) L$ K) O昆虫的细胞系，我只养过一种，是半悬浮的，很雷人也很累人……) z6 D; H% B/ ?
至于区别，要看是什么动物的了，培养条件上会有一些差异，不过摸清楚了细胞的特性，不会很难养的。细胞系比干细胞好养多了。慢慢来，加油学习就行了！

shihuijunm

hela细胞的培养条件为:5 A5 z; _6 p0 |$ T/ b
高糖DMEM培养基,100ml/l胎牛血清;（培养液DMEM培养基，含10% FCS，100U /ml青霉素及100μg/ml链霉素，于37℃，5%CO2孵箱内培养）下生长就很好,详细可以参照司徒镇强主编的《细胞培养》。' K5 o, q' B( Z! V
传代步骤: 1．倒去细胞培养液(对于小口的培养瓶可采用顷倒方法,对于培养皿,必须用吸管吸出)
7 G. K) b. x4 y! m; A( i. ^" P2．吸取适量的PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后弃去重复一次,以清于血清成分,; \7 k' C3 ~  M% t5 x& B
利于胰酶消化% }+ M, D* N! r% ?( I' x6 d9 \  ~
3．加入适量0.25%胰蛋白酶（一般100mm培养皿可加入1ml，15cm培养瓶加入5-8滴）转动培养瓶，使其湿润整个细胞房，高温下消化2-3分钟。' x# C2 d# _! u" @% t
翻转培养瓶，肉眼观察细胞单层，见细胞单层薄膜出现针孔大小空隙时即可顷去消化液，如消化程度不够可延长消化时间，或置于37°C孵箱中加速胰酶作用如见大量细胞片装脱落，已消化过头，则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作5 t% c" y6 U' q: j
4．加入适量培养液终止消化
9 O, J# Q( t+ D0 L4 K# ?! D) j吸取瓶中培养液反复冲瓶壁上的细胞层，至全部冲下轻轻吹打，混匀，成细胞悬液取样计数，调整细胞浓度为5′10 /ml / q+ C; b) t3 f9 n
15cm培养瓶培养时，吸取1ml细胞悬液加到新培养瓶中，加入4ml培养液，盖好,置37°C孵箱中培养。' N/ {+ b7 s6 x) ?! i
传代的天数要以HELA细胞的生长密度为基础,细胞密度大了就要传,应该每天观察HELA细胞,注意其生长状态.HELA细胞的生长分5期:
8 r; Y" b% s( m* p5 E游离期
6 w$ @( G1 c1 ~% [) V; ^细胞经消化分散后，由于愿生质收缩及细胞弹性，细胞成圆形，折光性强，呈悬浮状态。
' E. c2 a7 w! N, l* ^5 e吸附期9 k- T, b6 A3 X7 H( T
接种24小时后，由于细胞的附壁特性，开始贴壁，圆形细胞变成延展状态。
9 p& `( D6 c' c; l7 K3 W! }繁殖期: A' F5 K1 k' _! D& Z
细胞快速生长、分裂，形成细胞岛直至细胞单层。- Z& W  k* z" P8 B9 R. u& Q/ E
维持期- k0 \% `0 Q1 T5 |9 {
细胞形成单层后生长与分裂减缓、折光性减弱，细胞内颗粒增多，由于代谢物的积累，CO2增多，培养液变黄。0 z0 G# [3 ?, l
衰退期3 f1 Q' c$ f' Z6 v2 A
如不及时换液和传代，由于营养缺乏、代谢物积累，细胞内颗粒进一步增多,立体感差，细胞皱缩、脱落、逐渐衰老死亡。
5 {; I7 s( v, L6 B5 \" ?应该在其维持期和衰退期及时换液.一般而言是4天换一次液.

crystal

写得很好，我也正好要开始养了，帮助很大哟！