实验室的日常清理，做一名合格的扫地僧

LemnisCare

PCR实验里最怕出现什么问题？当然是辛苦做出来的结果假阳性了。" Y  _# O" t0 g1 [- K* m& ]( I

# a, _' D9 N8 l, W( U当PCR出现假阳性的时候，我们常常会考虑是不是引物/Mix/*等等污染模板，然后一一排查，劳心劳累费时费力，有时还是找不到原因，简直要崩溃。" c% e# b+ ~% f' f! c

* y" z! D& M3 L. ^这里我觉得要延伸思考一下，这些试剂仪器到底为什么会被污染了呢？其实是核酸气溶胶污染。 ( b! f4 r; o6 v. }

1 M" V5 e, W# `/ |7 P4 V9 T( B  X
( T# T2 u6 `7 a离心机离心/剧烈地摇动反应管/PCR开盖/吸样时及移液器的反复吸样等等，会产生空气与液体表面摩擦的，都会产生核酸气溶胶，也就是实验室里（或移液枪内）弥漫着含有长短不一核酸片段的小水珠或小颗粒，这些小颗粒沉降（打到）到空白样中导致最后扩增出了条带。) M2 j5 R' B+ x" p9 p

2 e( X: y# j  B# ?$ q
* Q3 |1 r9 J$ U可想而知，这些核酸小液滴还会落到实验台面/PCR仪/移液枪/*头*盒子等等地方，如果我们不注意，这些核酸小液滴就会日积月累地积聚，这样做实验就特别出现问题比如PCR假阳性。) `% \9 ?1 w5 v4 }: P
! g% d. ^8 }2 A5 Q
7 r: Z! n$ y2 n' }! g$ ]
那么我们平常做实验或者实验室管理上核酸气溶胶（也就是核酸小液滴）产生了巨大的污染究竟该怎么办呢？+ K1 A/ g- r* h/ h1 v+ d

1 a8 C/ k1 |& k1 ~2 B
) M' Q3 M" u) a7 ~大面积核酸污染清除操作方法：! d6 N: g. Y( S* {. r
+ f* b! A# P; h2 `0 N8 v0 f

4 m% ]" a2 h9 b1 U5 u- M" f（1）对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行大面积处理，包括：地板、墙面、天花板、门、窗户等地方，同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；
1 v  @8 y: T2 V) M: T6 D" F' R- G" G/ b5 I5 b' M4 I
（2）对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行反复处理；对超净台等含有空气过滤系统的设备，请更换过滤网；对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行清洗，高温灭菌；
2 J, q2 V  y$ Q$ [; {& |6 @- [- b
（3）待污染区域及设备器件清理完成后，使用紫外灯辐照4小时以上；
5 o1 {9 P8 c5 _
5 W8 d! a* e; b' [（4）可请保洁员按照上述要求（1）（2）（3）连续清理三天；7 [1 W7 Z  \, k7 y1 L

$ k0 ^! p; R! Y* r  c, u（5）设计实验对照组（根据污染源基因片段），进行阴阳对照实验，根据阴性对照确认污染情况，可采用8连排PCR管（2个阳参+6个阴参）；若阳参起跳，阴参起跳，则污染需要继续清理；若阳参起跳，阴参全部不起跳了，则说明污染等到控制，可恢复正常实验；
( |* O7 C  |. m  C% S5 z4 g5 R# ?! b' ~' D0 p+ D

6 w6 F# D; D. {核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）一盒500 mL；10平米的房间需要2盒可完成覆盖；其他设备及器件根据情况进行采购；7 u3 i+ M% }! b4 l* P4 S

( o2 |9 \' S1 X# d4 }  E: U# w- W& U
. b# U6 D; m# S1 ]大面积核酸气溶胶污染非常难以清除，若不立即采取清理，污染会更加牢固，长期释放污染核酸，导致实验室停工。