实验室的日常清理，做一名合格的扫地僧

LemnisCare

PCR实验里最怕出现什么问题？当然是辛苦做出来的结果假阳性了。
1 O/ n4 v* s0 n8 v1 z& F: }0 _% S+ Y, o
当PCR出现假阳性的时候，我们常常会考虑是不是引物/Mix/*等等污染模板，然后一一排查，劳心劳累费时费力，有时还是找不到原因，简直要崩溃。/ j5 Y3 p$ y; a9 M% L

/ P- N& o2 F+ ~+ l- W这里我觉得要延伸思考一下，这些试剂仪器到底为什么会被污染了呢？其实是核酸气溶胶污染。 8 ]+ [/ N( j3 S4 {- C9 F  A; \9 q: t
" g4 A5 C4 Z, b; R$ a, k
* a) p! K$ `8 f& f
离心机离心/剧烈地摇动反应管/PCR开盖/吸样时及移液器的反复吸样等等，会产生空气与液体表面摩擦的，都会产生核酸气溶胶，也就是实验室里（或移液枪内）弥漫着含有长短不一核酸片段的小水珠或小颗粒，这些小颗粒沉降（打到）到空白样中导致最后扩增出了条带。
7 ~$ d- K" t0 ?; H3 |4 w0 @
5 h$ [3 x4 [4 m/ N6 A0 {+ ?( O2 z7 Z$ C
可想而知，这些核酸小液滴还会落到实验台面/PCR仪/移液枪/*头*盒子等等地方，如果我们不注意，这些核酸小液滴就会日积月累地积聚，这样做实验就特别出现问题比如PCR假阳性。" U9 H& d) B4 a  L- W$ f$ b
" D- a! v+ m8 b

7 ?5 v7 m1 T) M0 s/ {( g- j那么我们平常做实验或者实验室管理上核酸气溶胶（也就是核酸小液滴）产生了巨大的污染究竟该怎么办呢？! `& u. V- u3 x  K! L9 z; B

$ F' \1 d- e! ]; ?' g
: `0 g2 s- l# @) S) b8 H大面积核酸污染清除操作方法：
- I: r6 ~. V+ y0 P
+ N4 O/ C+ \" L6 E$ `9 K/ N/ O
; l/ L& c8 v$ n* ?9 Y' ?8 E1 s9 g5 n, w（1）对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行大面积处理，包括：地板、墙面、天花板、门、窗户等地方，同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；
, J5 {; _- E% z+ p& X7 G% W
7 y. G/ g  l2 A* h% ?7 p0 g（2）对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行反复处理；对超净台等含有空气过滤系统的设备，请更换过滤网；对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行清洗，高温灭菌；
$ y- S1 d' b: {" ~
" j- C& d2 w1 O4 [. ?% s$ d2 k（3）待污染区域及设备器件清理完成后，使用紫外灯辐照4小时以上；" c( f. f6 M* y0 w( ~/ t

. L3 p$ S9 e  _9 S（4）可请保洁员按照上述要求（1）（2）（3）连续清理三天；
8 p. N5 c, g8 f. J" g7 q1 z
# y0 ^! W$ m  m4 e/ F. T（5）设计实验对照组（根据污染源基因片段），进行阴阳对照实验，根据阴性对照确认污染情况，可采用8连排PCR管（2个阳参+6个阴参）；若阳参起跳，阴参起跳，则污染需要继续清理；若阳参起跳，阴参全部不起跳了，则说明污染等到控制，可恢复正常实验；
2 `& m- T$ X& G3 z
  G, o  U, ?& X, V; v1 w* U0 }. E6 z
核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）一盒500 mL；10平米的房间需要2盒可完成覆盖；其他设备及器件根据情况进行采购；
8 `% Q6 V8 t! C  G: J9 e- p! u9 q" B5 R/ j% e! u

+ _0 n2 I" f& C& x大面积核酸气溶胶污染非常难以清除，若不立即采取清理，污染会更加牢固，长期释放污染核酸，导致实验室停工。