今天养MEF过程中发现的问题，请教大家

cony

今天我要复苏ES细胞，对MEF进行丝裂酶的处理。处理前六孔板上MEF还是铺得80-90%汇合的，但是三个小时的丝裂酶处理后，发现MEF饲养层变了，如何变请看图，图一为处理前，图二为处理后，红色区域为无MEF区域。。。' R. j- k1 C0 |

ellapan

你这是怎么拍的图片呀 红色的来个特下吧

开心果王

楼主，贴张真实的图吧。您这有点抽象啊！$ h- g( w1 u( _  y
丝裂霉素的量是多少啊？会不会太高了。

ambassador

红色区域可能是凋亡的细胞？

mominglily

哇，太卡通了吧？到底怎么个改变啊？！

jiejesse

我倒感觉到是你自己用枪头或移液管吧那些地方的细胞给刮掉了，不然不会出现这种情况的

cony

向大家汇报，用的是10ul/ml丝酶，而且绝对不是换液时吹走了。暂时没有光盘复制下来，不好意思

cony

还有，今天又碰到了一种情况，我用的是六孔板养的，发现MEF从孔边缘往回缩，有的缩成一个乳白色不明物体，应该是MEF组成的，本来是长得很密的，结果缩了以后就基本上变没了，郁闷。。。也是第一次碰到这种情况。大家有没法啊？就算MEF长得好，我复苏的干细胞也长不起来，太背啦，大家指导一下啊。。

上海过客

还有，今天又碰到了一种情况，我用的是六孔板养的，发现MEF从孔边缘往回缩，有的缩成一个乳白色不明物体，应 ...
. O6 a# \% a. s+ m( z: Kcony 发表于 2010-5-5 17:34

  f5 y3 Z5 d' c$ e8 p9 N% P

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7 ^9 @- r4 U0 |# {4 @/ Z& I7 z# x, M    我好像也遇到过这样的问题。不过很怪的是 ，6孔板中只有一个到两个孔是这样。
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怀疑是 6孔板的质量问题。

zsc78

个人觉得可能是MEF的状态不好，细胞密度比较高，被枪头刮到的地方容易脱落。不一定对哈。