LIF应该如何稀释呢？10-7次方的

上海过客

LIF应该如何稀释呢？10-7次方的
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买了够配10升培养基的LIF应该如何稀释呢？9 N: q3 s8 Q, \3 _, @8 ^9 H7 A
, K) I' d) c/ i
想把它小量分装了 。  250ML 或者 500ML的 量 。
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1ML 的母液用着感觉 不好  ，浓度降一点 ，分装一下 。
  U# t" P# q+ Q2 R) V
9 z1 Q- }. O( ]' U7 X做过的 ，请不吝赐教

周会

我买的是10-6次方的 ，不稀释直接用，每次加千分之一！

wyannb

我买的直接就是10六次方Iu的，用多少加多少，这个在四度保存也用不着分装啊。要是-20的话分装还可以。

上海过客

10-7 的 价格 便宜啊 。

tianangelt

回复 4# 上海过客 / s: X- l" J: \

: c0 P( U& q, t! w. k
* s8 Q; G4 R( l/ U6 |; B" m    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。

hcoohboy

我买的是Chemicon公司的，四度保存，不需要分装，除非很多人用，每人分一支

上海过客

回复  上海过客 / U8 P" u# ~& e% z9 p( Y

1 R, P! }* Y2 p6 |& o  y
$ y2 {; I; h. O( [, a4 }    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。
0 J7 o+ x$ X3 |tianangelt 发表于 2010-5-5 10:15

+ j% G+ h/ a- u2 r  O

( g, K/ n3 X4 `; D+ U6 m/ y- W- m是培养 干细胞的 。

上海过客

10-7 的包装 盖子比较讨厌 ，不是螺旋盖，好像胶头总会有一些溶液，看着挺可惜的。1 `6 b; _- }7 R7 b) S# h' Y3 c; a
  i) m- V. D9 ^/ y  B
所以  想分装一下  扩大一下体积 ，损耗小一点

qgjin

% H( W* m7 I/ I1 o% ?% e9 z6 r- o
' X$ Q* W9 r- w3 D+ R. j& l  d1ml稀释成10L？   你先看看标签， 是不是有PBS稀释的；要是是 请如下操作；8 t( o3 a  n" B
1：取 1ml LIF 移到15ml 灭菌的tube2 J) ^) K1 ?! ^( m
2：用 1ml  PBS （0.22um过滤的）冲洗LIF 小瓶（小心不要把PBS洒出来）；& J" T2 c5 E- `- ~1 |& l
3：将冲洗的PBS 移到15ml 灭菌的tube；7 d; Y3 |$ }' {9 y3 c
4：将步骤2-3 重复3次；
% e6 A/ X, Y/ \2 f5：将15ml 灭菌的tube定溶到10ml，封口并混均；（直接添加6mlPBS有可能不够）5 v( n0 @% S2 G; {, v  t
此操作中，15ml 灭菌的tube最好是 10ml定溶瓶。
* w" B. X! \2 _! Q+ W6：将0.5ml LIF 稀释液 装入1.5ml离心管（灭菌）；# ?) X5 v' g7 N0 a0 f2 f. ~. ], p, @1 \
7：用parafilm 封口，标签，保存（原保存温度）。! T" c: b' ~- A
每配制500ml培养液时 添加一管（稀释的0.5ml LIF）。3 ^: a$ }+ }# Y! P1 \
此方法一般适用于配制培养液，或大容量的（100-1000ml）稀释。
( |  d* ^7 U% X- W- m1 B& G0 S1 `方法二
0 r7 {! v) V& K! n1：取450ul PBS 移到1.5ml离心管（灭菌）；
, h9 w4 @, D7 K+ O4 Z7 z2：取50ul LIF原液 移入到装有450ul PBS 的1.5ml离心管（灭菌）；5 E7 Q& l+ l+ t3 D* n0 ^& x
3：封口，摇均，标签， 保存。
& [7 D6 O$ I# e; m- D+ }9 F; h此方法适用
- r3 _% a1 i" j2 \& X' x! ~/ d注意：必须封口，贴标签；操作要在洁净工作台。
4 n2 ~4 s- v4 z) b# n原理: 1ml（20*50ul） 可配 10L（20*500ml）培养液， 因此50ul原液可配置500ml培养液 。

qgjin

对了，使用时，可以用小型离心机离心一下，使贴在盖上的液滴滑入1.5ml离心管底部！！切记！！！