脐血MSC和红细胞裂解液的讨论

mbpsky

请问一下战友们' ?; \/ J8 @# d7 D: ~
你们分离MSC时脐带血用红细胞裂解液吗？. f% v; J; h6 _: u4 Z9 d  W
请用的战友介绍一下配方和用法# E. V  q7 d2 E
先谢谢了！

echo

养间充质的时候，不用裂解液也可以的。脐血分离后红细胞是挺多的，但是直接贴壁来养间充质没有什么问题。

mbpsky

回复 2# echo
/ N5 [" p8 [9 {% K" {( g: M5 K* \
. a- O6 v- @/ v, q4 l
    直接贴壁效果不好吧，细胞不纯...尤其是脐血的..都是幼细胞，贴壁能力也很强的

Robert-A

养MSC不用裂解液，如果你想用的话可以用氯化铵或高渗氯化钠都可以的

echo

回复 3# mbpsky 0 h' Z5 \1 K+ ^5 @0 I" E" K

: I6 c6 y4 q7 K, Z
2 ^! O4 s  }: Q9 o2 c    摸索换液时间应该还可以。

willow0711

回复 Robert-A 的帖子7 ]  _' l; z) D1 M* U4 l
- \# D9 I# ?8 Y. D; I4 o, k9 y  u
你好，请问你说的氯化铵或高渗氯化钠的具体浓度是多少？怎么配置？作用是多长？谢谢

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓还低

金戈

氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）
& z+ F/ X& N6 N3 V80.2 g NH4Cl (1.5 M)9 L: ]2 e  k+ b% h4 O
8.4 g NaHCO3 (100 mM)
# X$ @1 d; F  L# C( B3.7 g EDTA二钠 (10 mM)
  e$ E8 n) e0 ]2 D- g$ @加水至900ml，然后用1N的HCl或1N的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
  ^/ C) X4 h7 C0 ?7 _# j. ^该10×的储存液可在4℃保存6个月。, V/ ~! v1 }8 ?5 Q
工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓的还低，所以有可能会分离不成功。

jxaf3900824

可以不用红细胞裂解液，贴壁生长挺好。7 B* `; W+ `3 @2 E% Y9 @# x  v( b