脐血MSC和红细胞裂解液的讨论

mbpsky

请问一下战友们) o0 w/ v: \* ^0 b, i
你们分离MSC时脐带血用红细胞裂解液吗？
! c/ v) f6 w0 ~6 d) f& r请用的战友介绍一下配方和用法
1 x( l2 h5 h. }/ H0 v' V9 U% |先谢谢了！

echo

养间充质的时候，不用裂解液也可以的。脐血分离后红细胞是挺多的，但是直接贴壁来养间充质没有什么问题。

mbpsky

回复 2# echo 9 m+ n8 f: j* R+ Q5 d1 A8 j
4 |8 m7 l2 V. R2 ^
4 b: \* d( `4 b' {( j& G6 J% i
    直接贴壁效果不好吧，细胞不纯...尤其是脐血的..都是幼细胞，贴壁能力也很强的

Robert-A

养MSC不用裂解液，如果你想用的话可以用氯化铵或高渗氯化钠都可以的

echo

回复 3# mbpsky
9 ^6 I0 G. Q, K# j2 ~! _4 C& d# L3 T, e6 N9 }
) O  Q3 u* u: ~. V9 r
    摸索换液时间应该还可以。

willow0711

回复 Robert-A 的帖子
3 ^9 @* I5 J. M, D: _& e# c" g- R8 I( z7 e9 ~- L
你好，请问你说的氯化铵或高渗氯化钠的具体浓度是多少？怎么配置？作用是多长？谢谢

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓还低

金戈

氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）! Y: y6 |. D) F
80.2 g NH4Cl (1.5 M)) ^# }" n! e3 y. l9 w  b- O
8.4 g NaHCO3 (100 mM)1 e" f* c: r3 H  x- U8 a3 b
3.7 g EDTA二钠 (10 mM)! v/ p# x. z$ l( a% t
加水至900ml，然后用1N的HCl或1N的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
1 m# N- x0 L0 @7 \$ y: M- l! @该10×的储存液可在4℃保存6个月。# f/ N+ T6 V2 A- M
工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓的还低，所以有可能会分离不成功。

jxaf3900824

可以不用红细胞裂解液，贴壁生长挺好。
9 G. g' m7 G6 G; H' @9 Q