MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？& a" E# j3 I9 |. O
. i# g$ ~* }, T& B
越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？
7 y* h; c8 r5 L0 B
) z+ @2 O, d2 L* h' K# V谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客 4 X4 N/ V5 ]% ~- t

$ C/ w4 F7 |3 A/ n; GMEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。& C; ]$ G; |7 P" a! T1 ^

# X6 p9 \) |" B  m不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。. H7 V' g: d, R/ `

$ ~7 Y( ~; t& _1 u; V我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj * X! I6 N7 C1 {' }

1 t9 G- `! U/ o  J
& V' h3 [  S! c    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。3 F$ w5 c; i0 Z' U( S. q/ m
另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj
2 h( T4 e& @# I' D( B6 I. n1 y# J5 X5 ^/ @

' D) \+ h8 o, t7 R    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...
/ L# V, _9 ?7 e2 gxjya 发表于 2010-6-30 16:54

/ u; ?  E* ~/ M, ?7 o. \
4 z6 {9 p. i8 ~  Z谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？; c7 e9 j. ~0 ~9 \
9 x& F" H8 H/ k( K
这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客 # v0 I' ^0 E8 [% {

( J+ {) d* a8 t: E* O/ Q5 ~% u( k8 WMEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。+ W# w: E6 l' i
9 e  O3 M) o% s+ ~
不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 .../ |$ ~* k7 `# J$ `/ G
shewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。. a+ p! I! ?$ `6 o

9 C* J5 o! Z! M' O我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。3 N8 u2 }% Q2 O& {, N# w' r8 _
* v# h4 ~% o, n: G6 _4 o
最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。3 ^6 I8 [8 u4 S4 p8 w
! Q. B3 z, c1 B! Y4 ]" ?7 g
扩增不出来 反而 是  有问题的 。