MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？
" L& b5 O( J; Z8 h" |! {' Q, S& {9 E% @- a, S2 ?/ C" V9 o; S, h
越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？
4 m( m  @3 `0 h2 L% y3 g% m8 C" }
谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客 % T/ ~' f3 T0 V2 b# b" j5 \1 n
, M; Q5 P8 Z- L) E3 u1 H  ^8 E* z
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。( H7 `0 Z4 z# Z4 y$ L0 h6 {4 l

9 j2 M4 ?) |, c$ E8 t' [4 F2 Z0 g不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。. P' c  Y# ]; K
' H' U' i( p) Q6 F1 c' U
我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj 6 H/ P8 l$ T; `3 s- i
0 {: i+ `! [3 K
! g  U9 X. I8 L# U
    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。
, R0 j1 W5 W! Z" T5 d$ R9 R& q) s另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj
+ N% k, Y" H( A# ]" D
( d5 A6 H" S% Y; d& T; G: |
$ z5 Z. X. X: O3 X& ^6 W0 Y    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...
( }; R2 k( M8 b7 A9 Nxjya 发表于 2010-6-30 16:54

9 B0 G  b/ w/ N+ p; M  x9 o
! U- ]/ j2 f' Y. J4 _
谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？
3 {# k; x/ x5 @+ w$ r
8 Y- A6 n  [  \: p; p这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客
% \  t7 @* D+ j5 N6 x- M) H9 y. ]) A6 ^' ?: Z7 {' ?3 `
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。5 i$ q% F6 q9 x( i

* Q9 R( b% s- ^5 [$ i4 Z不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...0 Y+ R% y2 I: |
shewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。
; t% z6 i* E% l: p: }( x( y4 X! h; y$ Y
我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。" G8 R: Z  F# @$ e8 i

/ H9 I! D/ @: D6 b* g- w最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。
9 a: V7 k( {+ d
) s( C, s8 {6 k( y扩增不出来 反而 是  有问题的 。