MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？( o# t& @/ O6 l$ G. r6 n

$ j: F! b2 s3 S6 L+ ^1 Y0 x; M& i" \$ g越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？0 T  G3 T: b  B! F# M2 b

3 m$ w  O1 C1 X/ n( n+ m谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客
* u1 K" Z, W( L! O% V
" P* ^# u) v( d- pMEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
: s" [4 k8 b' b, u2 l( m  |3 `9 X1 b# E
不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。
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我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj
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    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。: j; N1 f, k4 Z6 p
另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj
5 b* c" o1 p& [4 P& D; F: `. R* g& g: G/ I

; ?: I" J. f3 s3 ]& N/ u! {; R    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...
# Z. \3 Q- R6 Xxjya 发表于 2010-6-30 16:54

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6 X" N% Q% x; U4 @: H' u谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？" \! F+ m8 a! r' \% G1 g/ B4 t
0 ~4 }7 n. _  V6 z6 i$ C7 T; e5 b2 O8 R6 O
这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客
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MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。5 P" f* G$ X( A) B2 \) z. W
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不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...
7 o2 g- q; r" M! T; Y, gshewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。& j7 L( D4 X# ]) C! J9 |" L

6 b: X4 y  h& P1 N3 |我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。
( l+ Q: p, u$ U( w
4 Z8 f5 L; n$ ]1 W. K# _7 t6 V/ r最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。
0 O. w1 ^( n; [) r& p9 V9 t- I' ^, {. n
扩增不出来 反而 是  有问题的 。