MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？5 x3 K- T5 T1 Z; N- @) r

) ~) Y4 k9 ^, S9 a越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？
* t  U! w8 E+ y
' A3 F) z/ O% r+ T: z$ O谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客
; B. B5 z7 G% G: t; {: g# {, U1 _9 t! X5 n# t& m. U
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。; h0 f$ k5 n  ~  Z/ W" Y3 s

. T$ B3 o' z6 g+ a" Y) S不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。
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我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj " T6 l7 a: ^$ M7 R2 n

- |2 ]: m. D2 W+ J1 @* W2 `; [" w4 i: X* ~: k1 _+ w5 w8 J) M
    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。
+ E6 W7 k& `& B: l. z" b6 ]另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj 8 E0 D" l) L7 o! A; f
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    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...
5 T. \) B1 ]: u* n+ \+ gxjya 发表于 2010-6-30 16:54

2 j; W6 V* |" Z0 ^$ X+ \$ o& H/ l

, [  E8 g7 i' B* T% s谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？" x4 }+ x* _. G/ S; [- I5 [

$ w% q4 X; b- e+ i8 b& k这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客
' q% T' {6 z2 b# B) o0 r" {$ G) M) @5 r* J
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
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% y  {; z( Y4 l; \  r  n不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...2 T3 D) q2 g4 Z5 k
shewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。6 v# J+ i4 i/ f3 X% T, M1 ?( e+ ^

. i- C" l: K0 @' m3 `我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。
8 }( i5 |" `  W4 u. Q3 ^- x5 a+ a  e% x$ H! @" T
最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。/ X& \" i9 K7 g3 L
& a2 y  k5 s; w- F; s
扩增不出来 反而 是  有问题的 。