MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？
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* X- v0 ?4 g# h1 W7 w9 |: ?越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？
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* V' O4 H- x% T" k+ W0 q6 f5 ?: D: z# ^谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客 # I. W' B9 Z( l1 W  I+ x% W
1 r& f- }5 _- J  @1 f  |/ X
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
3 I+ y1 ]2 `0 s3 Y) \- j# u
3 A, D: D- N8 Y7 ?: u; C& }7 e不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。$ u  T$ m! {# _: J! w) E

/ f9 N1 x* s+ ^0 m1 W+ b我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj ; @% `) w* Y1 @5 n4 O0 n+ Y

+ S6 o) t, Y: A4 m( e8 A
& e. M1 }5 U4 S. q* z    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。  l1 I2 I" u' N
另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj 9 M  O% m: s+ U

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; c' d) B. g, j8 b+ `# Q" \, A    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...
3 p' O+ T4 f! ~, [8 Bxjya 发表于 2010-6-30 16:54

9 g& Z- e% e, s- E
- `& M. T: L* ]; I& f$ L谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？. ~" o7 K# Y  T+ I% a$ \* H
6 V" A' s1 L; ^9 o5 O4 s
这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客 4 ?$ U+ c& ?6 m- V. K/ r1 Q

! h  l7 ]  y8 M9 [1 C8 ]MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。  U  h8 Z3 y( d9 `0 z- g

: h' I9 l0 F9 X" X/ N; t. X不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...- r4 Q5 `$ I# G$ b; c& M! O( |
shewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。
+ h9 ~8 N6 B: e0 C$ ?
' I8 r2 w9 M$ R: _& F7 a7 w我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。$ v1 ?" s0 J+ N2 Q1 Y3 [9 g- O6 ]
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最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。
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扩增不出来 反而 是  有问题的 。