MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？
3 N. @: {( v' C, _
8 C' j  [1 o+ S越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？% N  n% }4 N7 \3 b0 _* Q6 F. m
  f8 R7 M9 @  H# w
谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客 : B8 W7 d# t7 Y' K: ^8 r
1 T0 X1 S- @: J
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
7 I: e. e$ r9 m, A) p( t/ d9 [
' c9 ?. ^$ t% i- T' k  u: Q# c不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。3 U7 V" y7 q: s/ Q5 s( }

0 R7 H) l1 J+ n8 R; S我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj
6 D$ s4 `$ Q" o9 N, }- i- C) k' f# d8 _

( \* f! o0 Y0 A4 D$ [    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。* y$ A& H3 \! ?4 d# T! H& q
另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj
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) c$ b8 b7 C8 o8 a    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...' ^* H) M; `- T
xjya 发表于 2010-6-30 16:54

  t2 |1 I) Z2 S( q  F1 ?
1 Y, m' b  ~* \! ]* q谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？3 ~5 \* a! ]/ |. i# y$ S
9 w/ D! M2 _1 F& J7 A
这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客
6 b  G2 U! m: r8 f9 a' \% p/ u- D/ {) s% T$ I$ p
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。; X+ r. s8 k; w

8 C2 A# Q6 g2 k3 `$ H1 Y+ h不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...
* A% |# k. ^: a8 K: Ashewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。
5 w( F6 t/ g+ [  G; S+ ^9 H
6 S1 K8 q5 F$ v我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。
) I0 x: _5 l: k( U, r9 ~3 c; ~* Z9 R( f0 z: d) B. {9 I
最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。  k7 W2 {/ K5 l7 F

6 }5 L9 E" j9 C扩增不出来 反而 是  有问题的 。