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SD大鼠骨髓间充质干细胞,又失败了,不知问题出在哪儿   [复制链接]

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发表于 2010-8-31 08:43 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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发表于 2010-11-2 18:31 |只看该作者
我开始时用DMEM培养基,细胞也是一直长不好,而且长得很慢,后来换用了α-MEM,感觉还不错!
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发表于 2010-10-22 12:54 |只看该作者
消化时,放入37度恒温箱一分钟取出,在显微镜下观察,反复数次,敲击培养皿壁,试试这样吧,会好些。
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发表于 2010-10-21 08:53 |只看该作者
如果分得不是很纯 可以适当提高下密度
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发表于 2010-10-21 08:52 |只看该作者
感觉细胞密度低 原代接种时可以提高密度 我记得以前做鼠的是2×10的5次方每毫升
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发表于 2010-10-20 19:45 |只看该作者
选择接种合适时机,合适培养基血清浓度比例,如果都没问题,是否考虑一下其他的干扰因素从中所起的作用,进一步改进一下实验步骤!
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发表于 2010-10-20 19:04 |只看该作者
用玻璃瓶消化时间短,大概就1分钟,塑料的时间就长点
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发表于 2010-10-17 16:11 |只看该作者
原代细胞会杂有很多其他细胞,细胞粘连比较多,从楼主原代图片看,细胞种瓶时吹打不够,细胞贴壁时都粘连在一起,且不均匀,而在传代后,会逐渐变好。传代图片看接种密度有些低,如果按1传2,可能和你传代时细胞汇合不够有关,还有你的消化液及时间有关,不过从形态看,细胞状态可以。
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发表于 2010-10-17 16:11 |只看该作者
原代细胞会杂有很多其他细胞,细胞粘连比较多,从楼主原代图片看,细胞种瓶时吹打不够,细胞贴壁时都粘连在一起,且不均匀,而在传代后,会逐渐变好。传代图片看接种密度有些低,如果按1传2,可能和你传代时细胞汇合不够有关,还有你的消化液及时间有关,不过从形态看,细胞状态可以。
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发表于 2010-10-11 21:44 |只看该作者
密度真的有很大的关系吗?消化的时候吹打有影响吗?
1 I, i9 W* L9 v3 |1 S8 Z8 p9 J/ `我做的原代长得很好,但消化的很慢,反复吹打细胞才下来。传瓶之后有的种的密度就小一些,长得确实慢一点,但是感觉状态和形态还挺好的。目前正在等待长得满一些。
: ]& t+ L7 q) F3 w) [" Q/ u  v要是做诱导的话,要等细胞长得满一些再做是吧?
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