SD大鼠骨髓间充质干细胞，又失败了，不知问题出在哪儿

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大家看图吧

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" t7 W6 ]5 b3 k; w/ i( Q; B原代培养第5天[attachimg]

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原代培养5天后传代。这是P1第2天照的[attachimg]

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3 }1 Z( Q/ R9 D4 k+ ?, y: C' cP1第3天[attachimg]

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DMEM/F12培养基，进口胎牛血清，10%血清浓度，培养基里加双抗。24h半量换液和72h首次换液均试过，传代时胰酶+EDTA消化3分钟后吹打。可是结果还是不尽人意。抓狂了，难道操作有问题。

小熊不杀生

3 Q7 C6 s! @* n
6 H% j" ~+ P* a7 y5 p1 ]% |你按多大密度接种的，有时候密度太小的话，BMSC增殖较慢，可能过了这个细胞适应期，也就长起来了

wsrz

其实没有严格每次都计数板计数，曾经计数过，是1X10^7/cm2。而且我的细胞从来消化都不不好，消化三分钟都下不来，都是靠吹打

bingo

培养基不是应该用低糖的DMEM吗？

hanchao

我养的人得也是这样，现在都P3了，也是一代大概需要15天才能长满，可是还是有明显的扩增趋势。学姐说，P5代后会好。不知道能不能，等待ing~~~

qwmwolf

我想问一下，怎么评价干细胞养好了呢。