核型分析G显带技术(附图）

liulilin

2 t8 m- ~" n  U* k1 [1 P! t
" z0 m& p; M: G0 E! Q" f* y. i3 b本人最近作染色体核型分析G显带，在G显带这一个总是得不到理想的G显带图片。我所用的方法是，（1）滴完片子之后75°烘烤3-4小时，室温放置过夜老化。（2）在消化前放在37°烘箱烘烤30分钟，（3）采用PBS配制胰酶 配成浓度为0.025％，（4）将配制好的胰酶放在37°水浴锅里保持恒温，（5）消化2分钟左右。（6）立即取出在蒸馏水中涮洗两次。（7）染色 ，（8）显微镜下观察结果。/ a1 Y/ h( r7 R! T. X6 m3 f
     如下是我制作的结果图。     请各路高手指点指点 多多指点！

2010-9-1 16:54 上传

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zpzp0312

这是什么细胞的染色体啊？
6 S+ e# ?) ?( P3 N5 A* k另外，是什么动物的？5 z( ~4 E0 W2 C$ z6 \5 e
有多少条？  Z$ R  i- z% i* t9 ^
怎么感觉数不清楚？

liulilin

回复 2# zpzp0312
" \7 v( O( @% _: y+ w9 R
7 O! S. @- Y* P4 {  B
2 J4 P% Q: ^1 r8 E+ A* t9 [5 `; [    您好 这是人淋巴细胞的的，是的 条数是不够，但是我想探讨的是如何得到清晰的“深浅”显带效果图，请指教！

zoutaoyuan

胰酶的消化时间要根据环境温湿度和玻片上的细胞密度决定- {+ x6 A) X; K! X
第二张图2点钟方向那条稍长的建议在镜下多看一下

hawkyiger

最近也在做间充质干细胞的G带显色，结果总是很不好，你能把详细点的步骤给我看看么，借鉴一下

panyanfei

这跟胰酶的浓度也有关吧

lifescience1

; R, d1 t+ L/ r' z: u# n1 j; T/ C+ e) Y
应该是用吉姆萨液染色液染色的吧  有可能是苏木精染液染色的哈 他们的染色有点相似

liulilin

回复 5# hawkyiger ( C2 ^9 m: Y! v; c  W3 m

; Z% r; d# G# q: K9 K) W/ \/ T2 r% J( |
) m  S( _9 K  ?) S! U; y+ F0 t( R' p    滴完片子之后75°烘烤4小时，室温放置过夜（因为烘烤完一般都是晚上了），第二天做前37°烘烤30分钟，  然后就是用PBS将胰酶配成百分之0.025的浓度， 并且将消化缸放置于30°水浴中 保持胰酶消化液的温度恒定，然后就是消化2分钟左右（具体时间具体定），快速在蒸馏水中涮洗两次。百分之十吉姆萨染色3分钟。

zpzp0312

我怎么记得胰酶浓度是0.25％: `3 S1 l4 `1 K3 b6 w6 G8 d
是不是楼主消化程度有些低啊？

hawkyiger

回复 8# liulilin
6 A! O: `+ Q9 o. f, R: ~. I胰酶看到一般介绍是0.25%，0.025%会不会太低