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DC 如何收获   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-11 17:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问大家一个问题:树突状细胞培养7天后要收获,该采取哪种方法?是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-1-12 00:08 |只看该作者
细胞刮刀刮
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藤椅
发表于 2011-1-13 11:27 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子
6 q1 j( J$ x. Q' ]
- Z; t1 C* u$ q谢谢!

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板凳
发表于 2011-1-13 11:29 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子5 i. P1 \0 u! F: s& ]
# t3 e% R, ~) G9 o$ t# I* g. ^
用细胞刮刀刮的话,会不会损伤细胞?
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报纸
发表于 2011-11-10 08:52 |只看该作者
4度盐水冲洗
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地板
发表于 2011-11-10 10:42 |只看该作者
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7楼
发表于 2011-11-10 10:52 |只看该作者
这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定,看不到白膜层的几率一般是多大?这个与离心机,离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。
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8楼
发表于 2011-11-10 23:56 |只看该作者
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: X8 p4 f* t5 @* [
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9楼
发表于 2011-11-11 10:18 |只看该作者
胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试
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10楼
发表于 2011-11-11 14:33 |只看该作者
大致是以下步骤:
8 m8 p7 t$ Q' _; T4 a3 }2 j把培养液吸出/ N1 _6 S- }  h! ~! `. I3 t
→加入适量生理盐水(75cm²培养瓶10ml左右)
4 Q/ Z$ k6 I& ?+ C& ~( _→把培养瓶平放,来回摇晃几下0 f  V! v+ C$ C) ^
→吸出盐水,重复以上步骤清洗2-3次
) i5 n( h  @1 Y$ g- G2 ]% N→加入适量生理盐水
% d) k( d& U8 |" E5 _- M- c→用移液管来回吹打细胞,使细胞脱落) ^: t6 ~5 E/ b+ w  Z# d1 z, ^) y: x
→平放培养瓶,用力拍打,再吹打→显微镜下观察. t% U, j6 J6 Z& p, ?8 R+ G4 N
→拍打,吹打,观察5 s8 h- m/ t, {! g2 e4 l  z
→细胞全部脱落→…………
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