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DC 如何收获   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-11 17:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问大家一个问题:树突状细胞培养7天后要收获,该采取哪种方法?是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-1-12 00:08 |只看该作者
细胞刮刀刮
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藤椅
发表于 2011-1-13 11:27 |只看该作者
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7 ~  ~3 W9 R+ o) z1 Q" e
5 ?, Z& b8 E6 O谢谢!

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板凳
发表于 2011-1-13 11:29 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子+ R2 }% |, d3 e1 _  M* U& M# S

" a1 w% ~5 v( q' h' j4 ^用细胞刮刀刮的话,会不会损伤细胞?
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报纸
发表于 2011-11-10 08:52 |只看该作者
4度盐水冲洗
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地板
发表于 2011-11-10 10:42 |只看该作者
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7楼
发表于 2011-11-10 10:52 |只看该作者
这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定,看不到白膜层的几率一般是多大?这个与离心机,离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。
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8楼
发表于 2011-11-10 23:56 |只看该作者
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9楼
发表于 2011-11-11 10:18 |只看该作者
胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试
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10楼
发表于 2011-11-11 14:33 |只看该作者
大致是以下步骤:
, {  U: [9 E5 H2 L/ K4 c把培养液吸出
5 g3 @* I( `' p0 [→加入适量生理盐水(75cm²培养瓶10ml左右)- h+ t$ }0 `4 P* _) l2 I
→把培养瓶平放,来回摇晃几下
/ r7 D  I! P0 X$ e0 k- s9 E2 q  Y→吸出盐水,重复以上步骤清洗2-3次+ e& ^- n9 ~- I8 y1 P
→加入适量生理盐水
" U$ }3 u1 g! A! w9 n6 C→用移液管来回吹打细胞,使细胞脱落
* |0 e/ n2 W6 E5 _! g& z→平放培养瓶,用力拍打,再吹打→显微镜下观察8 ?+ t2 l, W9 m: F1 W7 \7 E% i
→拍打,吹打,观察$ E" _$ s9 u! e; c% P1 ^! i
→细胞全部脱落→…………
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