请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

牙牙丫丫123

) e( ^4 d! K4 B! W3 m1 D7 ?

, A5 x9 Q7 T; C& |% V7 ^2 B' v3 o请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

zerollx

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9 J: k$ Z0 s3 N! Z6 ^* N; C3 d  g6 t( H' A7 L- D3 |
三胚层的鉴别
( e$ Y5 }6 `1 G. T: n/ R  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
& K6 `' X5 k0 I. V: l   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标: S4 z# h. H1 ~5 C4 o( p' i
志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin* y* m  B4 F. u5 U
3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。8 F' h" z- D, ~
     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达0 u: r5 V6 [. v# B6 {1 L% f) H% g
    中胚层：波形蛋白等
# G, o/ R7 |4 m+ u0 P2 O9 g    外胚层：巢蛋白等9 T! y+ c9 _+ Z
   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式

牙牙丫丫123

呵呵，不错……: I. c3 d. E! ~. x7 f

iyaofying888

非常好呀

coralqin

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

细胞海洋

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% l. I1 a$ l/ G! Q. n4 O3 s) M, h& G6 j# j
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jjjk127

好东西 ，学习:)

lp871

:D:D:D

shuishan

请教各位大牛：想做IPS向心肌细胞的诱导分化，请问形成EB后贴壁生长多久可见到心肌细胞，是不是可以见到心肌细胞跳动？上面说15天左右可检测到心肌细胞特异性标志蛋白c TnT，若想用分化的心肌细胞做下一步实验，是不是只要检测到了这种标志就可以了？怎样将其纯化了？好像心肌细胞是不可再生的，那这样分化得来的心肌细胞能否进行传代增殖呢？

细胞海洋

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) m$ _- k/ o' M
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