成骨成脂诱导液的配方

yangjie0329

有谁知道成骨成脂诱导液的配方，其中成骨成脂诱导液中地塞米松的浓度分别为多少呀？

tangyvhuang

诱导脂肪实验试剂：
- U3 P. y2 y0 g: N
+ E/ B; D, {6 A) @4 X1 F0 m诱导剂：（DEX  1um/L,消炎痛 200um/L,   IBMX  0.5mM/L,  胰岛素10ug/ml）
7 n! o3 j+ b2 K. M4 j$ L& s固定液：10%甲醛
8 ~; _# }# m) p  z, E+ X# v+ S, M染色液：油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中。做为储备液室温放置。 临用时取储备液6ml加入4ml蒸馏水中。过滤后并在2小时内使用。
9 p. f3 n1 l: B  b
6 @" B8 E0 |3 e1 _8 W3 q' \; z操作：1，固定：吸弃培养液后加入固定液5min.* U2 B7 P* Z3 _7 o) m
      2,吸弃固定液，加入染色液15min后水洗一次镜检观察* H( ?$ y" _/ q5 x: r' Z( p7 p) N5 J

tangyvhuang

诱导成骨实验试剂：
' e1 g" C% F" w1 Y& {* s& k诱导剂：（DEX  0.1um/L,  β-磷酸甘油 10mM/L,   2-磷酸Vc  50ug/ul,  ）- i& s; V: J/ R
固定液：甲醛：甲醇=1：9混合， 4摄氏度存放。
; a9 R! f5 c8 p6 ^- }0.2M丙二醇 ：丙二醇2.103g加入蒸馏水100ml ，4摄氏度避光存放。
9 J; |) F1 ~2 @% H/ I0 q2 D 0.05M丙二醇：0.2M丙二醇12.5ml+ 0.1N HCL  2.5ml 蒸馏水35ml, 4度避光存放。
6 {: y; d" V1 f: Q! R  基质液：α萘酚磷酸钠 35mg+坚牢蓝RR 35mg 溶于35ml0.05M丙二醇中
* n9 U8 u! x2 `5 C9 T7 M3 Z; z1 a+ U; a, {, ^, t
操作：1，固定：吸弃培养液后加入固定液30sec 冲洗，晾干。, g$ Z* H6 w' x/ `4 G
      2,基质液用NaOH调节PH为9-9.6，过滤, e8 g3 j0 N- W; \0 q
3，染色30min，最好是13摄氏度水浴
, o0 V3 @" t- Y4，冲洗晾干
4 X6 C) t1 h6 G8 \/ G# U

yangjie0329

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2 D7 n. }4 n: S% e  {
5 @4 ]* S; o5 t- @/ Q2 e# [: t/ ?谢谢

zerollx

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+ A, S9 o/ m: S& W+ J. k, ?5 i% L8 f1 `( u* s! y$ R
2-磷酸Vc 是 50ug/ul还是50ug/ml？

nannan2ping

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) A; \" }* V7 `4 h+ G. ?# a
+ ?) B5 W8 L: x2 g) k/ X应该是50ug/mL吧，也就是50mg/L

ljzmy82

直接到invitrogen 买一瓶成骨分化做得效果跟好，自己配得不是很好用，个人经验！

4445655

成脂诱导培养基主要以DMEM完全培养基为基础并含有10%FBS，1μM /L地塞米松，0.5mM/L IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤),1X ITS(胰岛素铁硒传递蛋白)其中1X ITS可用10μM /L胰岛素，200μM /L吲哚美辛代替。
( _/ r3 Q7 h- H- W成骨诱导培养基主要以DMEM完全培养基为基础并含有10%FBS，100nM/L地塞米松，50μM/L L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐， 10mM/Lβ-磷酸甘油钠，若无L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐可用50mg/L维生素C代替。2 y0 k) O+ v8 j( m( k- n
希望对你有用。

liuyul03

关于成骨啊，成脂啊诱导液的配置，文章上就有，而且非常成熟了，也有商品化的在卖。