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CIK的高效扩增技术   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

楼主
发表于 2011-2-21 16:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:
4 I: H# u) n( k$ Q# z0 v现有的方法:2 ?: a* K4 [0 p$ W, `
D0:IFN-r 1000u/ml0 s! @, R  `# z5 j9 Y
D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
7 O3 v/ L* m1 z, _以后每两天补充IL-2 。
/ W8 `3 _" @! w5 r# a/ Y) _还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。! n* G9 @2 d+ h/ I4 u
谁有更好的方法,欢迎讨论!/ r% e  ?& A# f5 B0 U% b; n( w. @' T
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-2-21 17:19 |只看该作者
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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藤椅
发表于 2011-2-21 20:20 |只看该作者
回复 get0715 的帖子
% G1 F0 j% R4 K+ E% \- e) s9 i4 F. j
( u2 S- ~% m, Z! JCD3又称OKD3
1 ~1 D0 e7 g" I
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板凳
发表于 2011-2-21 20:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
/ @2 S9 k* A7 m. o* F7 {
. N. F% s  o6 e8 E# a+ O  \) `多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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报纸
发表于 2011-2-22 22:42 |只看该作者
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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地板
发表于 2011-2-23 15:52 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子
& y$ a& r9 n" T5 i
! C& @( e* n- w  S恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?
" L3 s7 Q; Y- y  J怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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7楼
发表于 2011-3-3 16:17 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子- \  A. [1 K' E' E5 c2 u! n

* ~1 _! ~6 {  t( W" F/ b这个方法可以,我正在用
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8楼
发表于 2011-3-3 16:19 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
8 u. O0 Y6 S) J# d9 O) `9 \1 H  i- U" z* v$ P/ p" A/ C
瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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9楼
发表于 2011-3-3 16:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子& P& e& r: s! W! Y

+ F2 N+ t% y. _, m一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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10楼
发表于 2011-3-3 16:24 |只看该作者
回复 get0715 的帖子" t9 c  Q) O# k* v- ]4 c) {

$ v- ]* u9 C- a. Z应该是叫OKT-3吧
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