求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：
4 c% I; {# r  P0 m+ j4 p  W& j$ o; {: b
& Q, h2 I) {; X. a0 A    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？4 y  A+ U2 C6 m1 h, e0 h
$ e$ L# \, U' t/ P: r
    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。
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    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。+ s# Q. ]. @; Z3 `$ r1 R/ o7 F5 Z+ t

7 O) K9 H. K) N- ^5 t              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。+ b# A! n7 o, a; ?

- Y! J2 z# q1 _# Z: g, y. ^     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。! k; U; Y6 v0 y% i+ M8 P
           1 z' r0 n; n  W- K6 ~3 d7 B! X
               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。
+ t  i. g$ [& j. |* @7 B6 B
) c) R4 v5 H: d! k9 N               但有两方面你必须清楚：
7 ^, s( i: b/ K; \0 @4 \, l; m$ M: Q, s6 V) F- V5 j# \% w
               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。
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               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。; }9 v6 X! _# |' B

1 L5 @+ F, F+ Q4 @/ }9 }) X  \     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子
7 m8 W' k( ~3 p( ]" o7 d( P' Y7 B5 C/ n9 ~
非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子
( P+ f8 S  ^( i& f& {' Y3 Y
# {3 ]: z, }- M. q你太客气了。& r4 v  Z2 B% t# B: d' M: @! Y

3 z7 [! s% m6 h. C  N7 e5 f  Q能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。5 ]# @7 l/ ~! C& _% S! [
: l4 Y- C) M  [# I* o, u
欢迎继续交流。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子* V$ |5 V9 A/ W/ q/ z

1 M" X& E0 d" r0 Y' V% g7 p你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子8 ?& t/ U9 X/ Y5 s

2 k. |" o* n0 r& Kto Rena:
! g5 g3 x4 I( \5 w( U6 \% M
/ S" ~2 T- p' _0 z    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。. C) @- O' [! v+ \
! _' P. o* S+ z8 B$ C" P" H
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。+ M' l0 Q8 v1 G& t' Y! S
9 u8 _- \' Y& Z, ]8 A/ e
    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子! a" M( k: {, X

6 S, c! ^$ R( _; a9 T( G) }to Rena:+ A. ~. I8 D, B! y- y& Q

3 \+ Q( ]  B6 K# Q6 A8 |    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。( w; V. i7 o7 n

  s2 T, H; w- t# t: ^$ [8 G9 g    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
  k5 O8 w" N0 _; i3 l1 y* D* R( N9 Z% c4 P
    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

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' o, U1 {2 E) O- ]$ A9 F6 X/ F7 w$ f. Z: Q' d1 x
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：
0 A" q# h5 i: A/ Y8 U/ ~# S8 e4 e4 n2 f
    个人建议：
8 @2 O6 Z5 H; d& D5 s* A. [5 O2 f5 E3 k$ h
    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。: n. m, {& y; k
" U+ E! m. ~4 S! e* h
      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）; N! m7 K; c; y2 ~+ u
4 o! t% e) w8 `: ]3 `  I6 \5 G4 O* t
       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。
+ }' {; ?+ W! Y. f. v' K& c
2 s; X, h, i2 K  N, y) v/ _    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。" d  u8 _* \& \# K$ U7 e0 y. Y
, l: ]: e- C- B! Q; S
         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
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. J/ S7 u) [. f  w, i# v         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？
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         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？
4 y8 j$ ^4 h3 F( _& ]2 q0 R/ [/ o. e4 m  L4 P# e# ^
         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
5 L. X6 a1 _5 _8 S* p) u: S: R) _3 @, A0 F, r$ D3 N
祝实验顺利。

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回复 深海寂寞鱼 的帖子( S% E6 J% M7 i  T+ m# a/ S
) z4 P0 X6 G0 J4 a3 _
我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求