求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：5 g/ N% [! P# U' k% Z0 M1 C
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    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？
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1 T9 t" T1 X  c/ a/ P' Y- t0 r    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。) H+ |; O) h* v. q
; X4 ?. b, r2 S& A) d; Z. l
    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。
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% Z) c) ^# G* Y( z$ r* Q              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。1 c, x8 ]+ ?: n& C9 o
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     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。7 O1 C  W+ b, D+ y, m
           
5 F, K- I$ Q: p6 u9 F* `               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。
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               但有两方面你必须清楚：
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               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。
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               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。3 i: B, _7 z: X3 j6 @  U- x; z. S$ v: o4 p

# C. g  v/ I8 ], h2 g7 r+ D8 _9 Q     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子) x) M3 ^4 x4 @7 J5 s; h, `

  I/ q- S( ?2 f2 h9 B( Z非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子6 X/ P! M/ s: N( }

+ v- Z; q; c9 }9 N: q0 @你太客气了。9 C' q2 I7 V1 S+ @

) t+ @7 N8 E- [8 ]" `1 q  T0 S能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。9 `+ h) O1 |) q) {4 C
6 C4 U# S) Y# [' C: J5 R. \: ]
欢迎继续交流。

Rena

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6 t4 |9 r: J: g5 d' u4 e9 |
9 P: {# X: d& Y9 M9 m你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子- a2 o/ B% \) W( A. K

8 p% t& _. S0 N7 ]to Rena:& L0 n" r+ P- D% d
8 {* |8 W2 j$ n+ B$ f
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
, Q+ }1 @+ p6 T! `  A8 S( L/ P) i# k
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。+ S) x  x2 z/ E0 c6 i

* g& V7 v* Q1 x. ~  @* T8 X    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

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' _* R# W+ I* g4 D: l: y1 }* w, N. z8 _3 s4 D7 e7 ?
to Rena:% Z& [/ P  W5 g- X

8 c- O3 |( G* D; a9 T4 O    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
, A: i! T9 ^, Z2 y# k% u$ ]3 B$ i3 v6 T
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。: q. e! C) D' O

+ y& U, Q; c2 d6 V$ a6 h% O    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子, C, I4 I: q) Q* c6 ~. X; x, ]

6 N+ L- _# p9 H( n+ |. t谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：
  q0 G6 ^4 V, t- ]. o, d$ H; f# M0 E/ }9 r: I) U6 e9 y$ g6 M
    个人建议：; O- K; @6 a! a/ v0 o  |  I2 o
# b/ Q) U. N, Z0 l2 z' }7 ^% T4 }  {
    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。
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: f% f6 j! H; W7 T+ w      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）, l) J3 s7 ~& o1 e

; O- j1 U7 f& `( ]# S( `4 d       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。
  S4 q1 X. a. @% V  ^+ e& x$ Z/ r2 T+ }1 V$ M: |
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。3 J$ f% s6 S1 d9 [9 G* o

  K. U/ \* N/ ]         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？! q5 g; s% F7 l
" h0 h! y- ~9 d2 m
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？8 a% Y9 M5 a& B! N5 t

" s5 f! |9 n/ E2 A- W% M9 w         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？! I( `1 i) A7 D4 ]7 u/ Y

' Q. V) [  G9 E6 J+ N% G1 U2 V         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
5 {* C1 i8 E: ~( ^2 ^# m+ U8 N
1 ^: ~; Z6 B! i- b0 Y祝实验顺利。

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( S: Q* x9 w& |- Z7 Q: }5 F, ]$ f4 }0 m. R
我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求