求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：
0 l7 c$ u! j$ O/ e0 f
& r# O4 S2 `' p- t3 e8 P    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？
* j; L% Q9 h) L  d9 F7 H3 u# a& u* M* }9 v) [9 R8 }; U
    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。
& j, z! }/ R9 c4 k8 S. @) `) H
& h5 o/ C& F  j' g    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。4 e+ V' L! I0 T% @9 r, r
, D5 y! y& \& r  A
              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。  J% x3 J# t' d# h( p& l5 d, |' i3 \  M

3 _# p- a; i2 O" ^     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。  ~2 h, _% @$ o; ?
           " A0 \+ n1 A" ^8 m" ^" I/ R% \
               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。' {" ^6 ?8 Q% n" K& Q: L% |

4 D  F' d( E0 a  O               但有两方面你必须清楚：
; [' Q  r* M' j  |. |2 U' V% J% s1 R( l+ S  I+ L( y: M4 m8 |
               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。' H$ g! v* g0 O9 L8 Q$ r

; ^& m6 l6 m' y8 O               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。: E  L# Z5 j5 w' _" r
. L, l$ T& V+ B
     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子" ^8 G8 M* e* U; F& R; m

2 S5 s! W0 `  D- o. o非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子
$ ^5 k/ y6 B/ ?" v& z. g# b2 X6 t+ h* C( w( D
你太客气了。
& I2 ]. X( M  z2 f5 T$ k) A. o6 h) S) @
9 a( T5 G& }* c% z/ z3 K. g$ _6 C# ^能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。
3 b  y: s# e9 L" [3 _9 F' S, ~4 w2 F
欢迎继续交流。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子9 r8 g# w5 ^8 i0 Y
$ J, y6 f8 {% S2 L4 \2 F: M# Y# D
你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子# |' o- q' I; U3 f5 F* a
; @* J+ F7 n( ~( L) L( m" E3 l1 A
to Rena:- Z6 E. @- N" T$ @
  b7 S1 v! ]; J
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
. x. A2 s3 U7 J6 y- n8 M, m" y( O8 G
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。/ Z: \# U0 Z' S! e* f

. g1 U% v7 D1 f$ e7 ?, |% t    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子
! l8 ~/ H; G1 B0 z2 ?7 s# w# M. b# e  h' `: e+ _$ L" R; V
to Rena:
5 X  u& ~2 A" s
3 }/ q7 J8 V$ e    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
' }6 l# e0 K! L4 [, T5 b8 `* }5 Z, `4 z2 o/ [) v
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
9 H/ k8 }* n0 L) B) R
. A8 \, n) k1 O    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子* M; X- \/ q$ j/ A' ?7 S, ?

2 x9 K2 |$ @7 a) y3 V7 P4 N谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：
" T: s9 O; ^% g8 G% b# ?9 Q( ^  u. _
    个人建议：
0 ^1 Y; ^9 c, s$ o( {
- t$ D% k7 E. n3 X8 w' _    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。
) m/ @  a: z7 e, j
+ U$ d2 Q# X7 O/ F9 r$ s      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
; M  Q9 V* v  M/ N7 J
/ g( i+ f$ Y& }* c       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。
& b; K: M) p$ Z. o- v3 C) v, M/ K
3 R& h: i+ b+ y+ A- T6 d- f    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。
! i6 R" \" T& S" I$ Q. x% B
+ Y1 h7 f; o- ?5 q; B         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？$ o8 q9 `( }2 `! F
+ J5 j  b" K+ G/ V+ c" |9 l5 G8 w. m5 z
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？
; O2 p8 N5 E; N! P+ r: D+ [9 k* r2 C7 M6 i: x% o& N
         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？2 n! A, |0 O( _( g/ T

5 N& }  I! M# A; ^" i( N7 \8 Y         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。" x$ I0 F$ d: J7 e0 P; N/ e

2 c  o6 g- m" j, _9 w+ {, G  a; ^祝实验顺利。

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回复 深海寂寞鱼 的帖子- r' S& p0 G$ Q2 ]; S" x' ~
) C5 C+ N3 o& ]0 M! k, b
我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求