WB条带丑陋，求鉴定，求指点，煮样不充分orDNA粘稠？

7ubo

2011-6-13 20:20 上传

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如题，6cm的293T用200ul loading buffer裂解的，煮过以后离心是有沉淀的。

7ubo

回复 shuixiao 的帖子
5 z; F8 n' m# m1 V! G
3 E  W) e5 ~7 f9 e7 e5 C' }用什么方法定量？BCA？不会很麻烦吗？据说还要先作标准曲线。有没有简单一点的方法？直接测280？我用的是绿色荧光二抗，奥德赛扫膜。

7ubo

回复 aminhair 的帖子
6 h, g: S* _/ |5 c
" |( o/ A! T1 P9 I9 Q4 k谢谢，自己做的

7ubo

回复 zhenhua 的帖子
7 B" ]6 N: K; T8 Z0 {" Y: f% H2 P1 M9 `
每个孔上20ul。
! X! @, r+ n1 v( C' e煮20-30分钟不会使蛋白降解吗？100度吗？

7ubo

回复 hndxws 的帖子7 Z- c& l% W  ^* _- w0 v

7 }  ^2 p  F) D) [朋友，你的头像是一种带GFP的膜蛋白吗？GPCR？

7ubo

回复 wenyangapple 的帖子
5 _1 r0 h$ _: L! l# o, w& F/ U& k. A/ v& Q+ H2 L* W
长满的6cm的皿的293T用200ul的SDS loading buffer裂解的，是不是加少了？

7ubo

回复 chb611301 的帖子
. B2 t' a' f$ \' }- X
$ f) b; L# m% s1 J6 d+ cAPS少加点是不是比较好？