回复 kaxdd 的帖子 ; U N& a T8 ~/ M4 ?0 I. F2 }; s. [9 a
这个问题不知道怎么回答你,按照你的意思,应该是你已经知道了这个miRNA的序列,而你的目的是要在不同条件下检测miRNA的表达?那如果是这样的话,你要设计引物,应该是想要使用realtime PCR的方法来检测,由于miRNA太小,所以,设计引物的选择很少,所以,也相对比较简单,目前有很多商业的试剂盒可以选用,需要你可以自己去搜索一下。我搜到一个图片应该可以很好解释你引物设计的问题,一般是利用一端颈环结构的引物和另一端序列特异性的引物,使用染料法或者探针法进行检测,但这个是用在qRT-PCR上的,还有一些其他可用的策略到达对miRNA定量和检测的目的,比如northern blot、或者做RT-PCR后克隆测序的方法。 ( n$ B5 y3 _& @; o3 S! B+ y