CIK细胞培养中各种因子都起什么样的作用？

get0715

多数在培养CIK时都用到了IL-2（1000U/mL），IFN-r（2000U/mL）和CD3（50ng/mL），向各位老师请教一下，其中的各种因子都起到了什么作用，哪种是起到诱导作用，哪种起到的是促进细胞增殖的作用呢？由于试验中遇到了困难，细胞在扩增，但是CD56+率一点都不增加，是出在哪种因子上了呢？是不是因子的浓度不对呢？
0 t. L* f4 ?! ~再就是除了这三种因子，还有没有其他成熟的培养方法；还有帖子提到了细胞瓶在原代培养前用包被液进行包被，包被液的成分是如何的呢？可否指点迷津，多谢了！

ly200101042

CD3mAb和IFN是激活细胞的，IL-2是维持细胞增殖的5 D! M/ p  d. @& P
包被液可以用CD3制备，提前包被，过夜就可以% K0 i# T& `! Z
你可以尝试下加IL-1a,或者刺激一天后再加IL-2

get0715

回复 ly200101042 的帖子* Q% Y/ i6 A1 B1 g: Z% N$ u. C

/ z8 o, M" M8 e; O谢谢啦，可以具体告诉我一下CD3的包被液是如何配置的么？要多少ng/mL?

ly200101042

我们用的CD3是按照1mg/mlPBS配置的 然后分装使用。就是50ng/ml

hwlightning

更换一种培养基试试，
: P' C+ {3 M6 {7 J& ^' rIL-1a能够增加IL-2的量

hwlightning

更换一种培养基试试，
3 U; l  v' ^" i9 b+ mIL-1a能够增加IL-2的量

SunYouLa

rIFN-γ，对细胞杀伤活性具有增强效应，且只能是在IL-2 24h之前加入；CD3有促进增值的作用，对单个细胞的杀伤力没有加成；IL-1的单独使用无效，它对rIFN-γ和抗CD3起辅助作用。

txy_love

IFN-gama有助于增强细胞毒作用，CD3单抗能到交联作用，进而活化T细胞；IL-2能维持活化T细胞的增殖。

xuchao717

我跟您出了一样的问题，细胞增殖，但是CD56不增加，现在您的问题解决没？

星夜倩儿

回复 SunYouLa 的帖子! E( k4 c& o- n. y% R' c
  h- _5 ^6 s4 k  S# N9 f1 Y# M& S$ f
你好，请问一下，你们分离PBMC的时候有没有用过IFN-Y包被？IL-1β的作用是什么？为什么用抗CD3包被？有没有参考文献？