求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

牙牙丫丫123

  E% X1 x" v5 U" N. q: b% O0 V
- J' U+ o! v2 m% J: j/ `; l# o我养的是猪的胎儿成纤维洗吧，原代培养方法是0.25%胰酶消化，终止离心后接种，10%FBS的培养液，原来用这种方法培养细胞生长很好，可是这次培养时，第二天细胞长出来就特别老，而且细胞全是小黑点，请问这是什么原因造成的……是血清或者培养液PH值的问题吗？& @+ G6 G( U8 p1 i) F$ m

goohongzi

看着这个一团乱糟糟，不是支原体之类的污染，就是细胞长的太过了，按理说，原代细胞最容易培养了。千万不要让它长过了，或者污染了。建议原代培养时常规加杀支原体的药物和双抗

huangcong1988

回复 liuhuijing 的帖子: F. x" u& t1 X- t2 X

( C7 U- q, n" L; M刘会敬？这个还是很好养啊

smartyyu

怎么老有人说黑胶虫，不存在的东西吧

zhangjinami

如何鉴别一个细胞克隆9 Y( t- ~, H+ x0 s1 W1 O
如何终止胰酶消化 用胎牛血清8 C( U& b, r3 P  l
如何分离

liuhuijing

回复 星移龙一 的帖子5 d5 z* O7 h# J9 }4 y9 H4 ~0 w
! r* Q/ Q+ G1 F, P( w6 n
想请教一下具体养猪成纤维细胞的做法，我们这边还没养过，谢了。。。。

牙牙丫丫123

回复 wangshumin12311 的帖子
4 O- s  z" \& x# {
6 y/ {+ Z! G3 _& {/ j6 {6 s呵呵……是呀……

wangshumin12311

回复 牙牙丫丫123 的帖子
/ b0 o% o0 f7 T( g
6 q" d2 {+ [* ]天呐，没想到随便都能碰到母校的学生，，你是刘忠华老师那边的吧，，，没关系，成纤维细胞重新做，状态不好就扔了

liuyul03

从你的图片来看，首先你在做细胞接种时没有混匀，有的地方过于密集，形成复层，而有的地方还没长。最后一张图片还可以，但也有老化迹象啦。

huangcong1988

回复 牙牙丫丫123 的帖子" d; r8 A9 x  \
: {+ L( i% G, R" m( x% R
可以的，你转高倍镜下看，可以看到细胞之间的小黑点，是能看到它移动的