求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

牙牙丫丫123

4 b6 X6 S/ y4 {% ^1 K
+ x( \+ C- g3 {  m0 V' i8 r
我养的是猪的胎儿成纤维洗吧，原代培养方法是0.25%胰酶消化，终止离心后接种，10%FBS的培养液，原来用这种方法培养细胞生长很好，可是这次培养时，第二天细胞长出来就特别老，而且细胞全是小黑点，请问这是什么原因造成的……是血清或者培养液PH值的问题吗？
, U+ @" A0 W' V

wangshumin12311

这细胞救不回来了，，，重新来过，，，看有没有支原体或者细胞受啥罪了，，，血清正常的话不会出现这情况，，，，话说你是哪个单位，，，做猪的？

牙牙丫丫123

回复 wangshumin12311 的帖子
" g: j) z. E$ o- m, _  Z6 |" w3 J6 L3 E
您觉得这更像是支原体污染？我是东北农业大学的，我们实验的主攻方向是猪

军医

是不是抗生素加多了？

星移龙一

我们实验猪的用的都是15%~20%的FBS，原代都很好啊，传代生长也很好，不知是不是这个问题。

牙牙丫丫123

回复 军医 的帖子; f$ \* Q  F1 Z: {5 W5 i

' ], D: V: F- b( A0 q8 c# h3 o我加的正常抗生素用量

牙牙丫丫123

回复 星移龙一 的帖子, M  C1 S! e6 x6 ^; Y: Q
; e! Y( n; |8 `- B0 n5 _2 x
能请问一下您是怎么做原代细胞培养吗？
- L& f0 t8 u) M& S, b$ \

牙牙丫丫123

回复 星移龙一 的帖子
) x9 W# g/ k2 T; D4 `9 W0 n. C4 p8 J
$ u! E9 I- ^1 }3 ~' `5 Y2 i还有，我这次使用的是10%的培养液，有没有可能是血清质量本身不好，然后再加上血清浓度低，导致细胞营养不良呀……然后细胞就长成这样了: o  y) V5 j; l

军医

回复 牙牙丫丫123 的帖子" ?0 e/ @& a4 M

1 A4 E. F& m+ u我们用10%的血清养原代也挺好的，是不是时间长了，迁出的细胞长的太密了，生长抑制了

星移龙一

回复 牙牙丫丫123 的帖子- @4 _9 q* A$ x% j/ o5 \" c  I
3 m; j; i& u0 R* Z7 @
胎儿的取部分组织，剪碎后涂板培养，
- K; b# {+ ~1 \. {% E, K成体的一般是耳源的，将毛刮去后，剪碎涂板。