流式 求助

花饶然

用血清封闭液的话，是在标记前还是标记后啊？

wangzhiqi86

流式有很多用途，所以看你是做什么的，免疫荧光是标记前血清封闭

花饶然

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我做免疫表型的，谢谢

wangzhiqi86

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细胞流式鉴定表面标志物？那不用血清封闭啊

evial

在上荧光抗体前先用FBS或BSA封闭，冰上15-30分钟，去除非特异性结合。

zerollx

可用可不用，我从没用过

evial

不用？真没见识过这样的，想严谨发文章的同志们不能听信谣言

Tonypan

细胞表面有FcR，会非特的结合抗体的Fc段。所以在流式检测前应该用FcR Blocking Reagent封闭FcR。以减少非特异性结合。6 \9 W" w1 K: K3 F* M. Q+ P' W
血清封闭也可以起到一定的效果。  Z8 g) p' Z8 L  t* x8 @# S, n
尤其是针对稀有细胞的检测，FcR阻断是非常有必要的。
& Q7 O4 B0 S. [$ a1 g高表达的细胞有不做FcR阻断影响不是特别大。

827914734

我们用流式测细胞表面标记时，一般都是在标记后血清封闭

leisong12

到底有没个标准啊，怎么说什么的都有，流式测免疫表型，如果一抗不带荧光，需要用和二抗（带荧光）相同来源种属的动物血清封闭，这点我可以确定，许多文章都是这样写的。不知道如果一抗是带荧光该怎么封闭啊？一概用牛血清或BSA封闭是不是不够好啊，用FcR Blocking Reagent是不是成本太昂贵了，该怎么办，有没有权威一点的解释？