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楼主: doundo
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球长出来了,几个小问题请教,如何分离球? [复制链接]

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专家 优秀会员 金话筒

地板
发表于 2011-11-15 09:09 |只看该作者
回复 doundo 的帖子9 J, A2 K( i; m3 g9 n# G

, [" D3 c, `4 E  [: K" C任何细胞都会死的, 肿瘤细胞,干细胞也会凋亡。只是程度不同而已。血清和好的培养条件,细胞因子等只是是细胞生长状态更好而已。 凋亡是不可避免的。培养条件好,细胞增生快, 细胞凋亡死亡少。
+ f; b+ v! H" D5 J$ k( q+ @
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报纸
发表于 2011-11-15 00:08 |只看该作者
回复 meister 的帖子
# S* K% ^  M: O" D
9 \$ O" ~+ X, g- ?  m3 a5 R9 C! J- g感谢您的回复,请问是否是 除了干细胞(或干细胞与肿瘤细胞)外,其他的细胞都会死掉?是什么原因导致死亡(缺少血清?)?
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板凳
发表于 2011-11-15 00:04 |只看该作者
回复 bin 的帖子
/ X( m7 r) K* I% D* [3 ?( y0 Q0 Z! y' l2 i( b& T8 M8 Z. B4 X8 F6 d
请问除了细胞碎片外,那些悬浮的小细胞 基本可以确认是已经分化了的肿瘤细胞吗?——请问你做过鉴定吗?
; v) R  F6 B! t0 y5 B2 P0 ~" H: w
0 k; |4 K* I5 D) Y4 O0 `至于您提到的细胞碎片的问题,我在dxy上看到相似的问题,他们是这么答复的:悬浮培养NSCs传代后都会出现死细胞和碎片,如果不是很多,那么可以不用理睬。+ c5 G& p  y( E4 B' d  y
如果死细胞和碎片太多,那么我采取的去处方法是:8 m6 S% P# Z3 \; @# a& n9 _& U3 a
生长状态良好的悬浮培养NSCs,其密度会稍大于培养基,将neurospheres 和培养基吸出,置于15ml离心管中,3-5min后,球会沉到管底,而大部分死细胞和碎片不会。+ M( @( R( f1 R! ]7 a  C3 _9 a9 X
  O  K& F; t+ j# r( I8 m3 j
但我个人意见 后边那个方法肯定会损失很多细胞球。
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藤椅
发表于 2011-11-14 16:45 |只看该作者
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回复 meister 的帖子
5 n- A. v4 p; S5 Q3 @2 v6 ]3 \! H
! p. X: c" G4 Y- P; b) \我想请教一下,有时候悬浮细胞培养的过程中会产生很多的细胞碎片,怎么去除这些细胞碎片呢?
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沙发
发表于 2011-11-14 14:37 |只看该作者
回复 doundo 的帖子8 U2 s% [# P5 Q6 g
6 \2 ^( C6 c5 x, k
悬浮细胞细胞当然也会死。 可以通过离心,更换培养基, 去除死细胞。
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