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bFGF的问题 [复制链接]

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包包
2011  
楼主
发表于 2012-1-7 23:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:2 g9 R6 W( ~  [. U
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后,分装冻存。$ j* v; n/ P. m) T( @
(10μg的,其实也配不了几瓶medium...)# b$ j# C7 ~' ]6 u9 \  U$ X
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沙发
发表于 2012-1-7 23:53 |只看该作者
补充:
& d5 s  ?; s+ ~) i. }) i% G, f配制前,室温稍甩。
2 i$ F# J1 r- K" f- E主要是用买来液体的medium配,比较放心。
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藤椅
发表于 2012-1-8 06:19 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子% ?+ a* w6 p1 A2 _& l& f

, ^. w& B& T+ z你是用买来的粉加DMEM/F12 吗?
+ s8 n. O% X" w5 X+ W! b/ O1 A" Q; G我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C./ q% E1 m/ |' ~+ i; C3 T
放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。
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金话筒 优秀版主

板凳
发表于 2012-1-8 09:38 |只看该作者
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回复 白巧克力 的帖子# d% B9 ]6 C  q
2 F4 }5 g' U  M; `
我们是用10%的BSA来配置的 ,分装后,-20保存。
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报纸
发表于 2012-1-8 12:00 |只看该作者
回复 dianying 的帖子3 g0 [* w: B! L0 r1 C, u
+ Z! T7 q/ d8 N' D( e& }
不是powder,是liquid的DMEM/F12,就是为了不用过滤啊!
5 B) _2 X4 e' B! _0 Q4 G是的,我想加了后就分装冻了啊,然后就是用一支取一支啊) S. T/ t# \  w" Y% ?1 j2 L3 w4 F. x" ~
只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。
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地板
发表于 2012-1-8 13:48 |只看该作者
PBS with 10%BSA 来配置的,分装后,-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。
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发表于 2012-1-9 09:39 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子9 ?1 h+ B6 _" u7 D. F5 P* h  V
( V4 A9 h' u. g6 Y/ H; }
我通常配置到 100ng/uL
* ], z% f2 D$ I: U% A( c" N  @加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话,你每次用还得化冻,每次用的量也不一定相同,bFGF是不应该反复化冻的。
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发表于 2012-1-9 10:12 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
  [8 a1 S1 Q$ ]& o( o  K2 `
, w( M4 o4 {. I5 t8 ?各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。4 _& m5 Q1 g% T# u% U: p2 E4 k% M4 |
比如盐分,BSA等等。 所以根据你购置产品推荐, 如果用水溶或者PBS缓冲液溶,你可以用培养基替代。1 |7 A# y& A# s. D0 t, P: g
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优秀版主 金话筒 优秀会员

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发表于 2012-1-19 23:17 |只看该作者
我用Tris-HCL配的
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发表于 2012-1-20 00:45 |只看该作者
不是吧,应该是有专门的配置液,然后再加入到medium中,不然怎么消毒呐
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